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临床检验中发光免疫分析
临床检验中的发光免疫分析;由于化学反应(通常是氧化)或生物化学反应产生电子能级处于激发态的物质,后者通过跃迁释放能量并产生光子,从而导致的发光现象。与荧光最大的区别在于无需激发光,因此后者也被称为光致发光。;按化学反应类型 ;时间; 鲁米诺及其衍生物的增敏化学发光系统;AMPPD及其衍生物的化学发光系统;;发光检测的剂量--反应关系曲线;发光信号检测;单光子计数器是目前高灵敏度
发光分析仪的核心部件;单光子计数器的工作特性;单光子计数式发光检测仪;光生物学技术的应用范围;光生物学检测技术的优越性;几种标记/检测技术理论极限灵敏度的比较;几种标记/检测技术理论线性范围的比较;几种标记/检测试剂的有效期比较;0;夹心法的剂量--反应关系曲线;竞争法的剂量--反应关系曲线;发光免疫分析技术
的现状及应注意的问题;商品化光生物学标记检测技术性能比较;例如:电化学发光TSH检测试剂的分析灵敏度为0.005mIU/L
第四代化学发光TSH检测试剂的分析灵敏度为0.001mIU/L
原因在于抗体的亲合力,而不是检测技术。; C肽; β
亚
单
位; 结合蛋白;小分子性激素测定方法的进展;游离甲状腺激素测定方法的进展;游离激素测定法的试金石——稀释实验
以游离T4为例,样品稀释20倍以内测值无明显变化
(应扣除实验本身对样品的稀释度并注意基质效应,建议用6-8%BSA稀释);发光技术——
临床免疫分析划时代的进步;目前商品化发光免疫分析产品的几个特点;流动池检测方式示意图;标准化——自动化免疫分析系统对试剂盒的技术要求;间接包被夹心法原理 ;工作曲线的特点与校正原理;常见拟合方式的性质及其参数的含义;;免疫分析结果的干扰因素;同一干扰因素对不同检测方法的不同影响;使用商品化发光免疫分析产品
必须做好的几个工作;正常值参考的意义及灰色区域的存在 ;自身基础数据
——最佳“正常参考值”;灵敏度(真阳性率):对真阳性病例的检出率,即=检出阳性病例数/总受检阳性病例数
特异度(真阴性率):对真阴性病例报阴性的比率, 即=报阴性结果数/总受检正常人数
若某肿瘤筛查法的指标达到理论极限,即灵敏度100%,特异度99%(正常值为99%可信限)
而肿瘤的发病率多在十万分之三十以下,因此其应用于正常人群体检时,总阳性病例可能为:
30+(100,000-30)×(1-99%)=30+999.7≈1030;
其中,假阳性率=999.7/1030 × 100%=97%
绝大部分为假阳性!!!
因此,筛查指标的意义在于高危人群的早期预警,而决不是疾病确诊!
改进办法:采用多个厂家的产品或多指标联合测定(艾滋、肿瘤)
串联实验:多个检测均阳性才定为阳性,假阳性(误诊)↓,假阴性(漏诊)↑
并联实验:一个指标阳性就定为阳性,假阳性(误诊)↑ ,假阴性(漏诊)↓
取舍原则:分别对误诊和漏诊带来的医学、经济、社会、伦理风险综合分析平衡;化验结果与临床不符的原因;不同实验方法,
或同一方法的不同厂家产品之间,
其测定结果和临床正常值都会有所差异
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