化妆品中氨基偶氮苯和联苯胺的检测方法.DOCVIP

附件6： 化妆品中4-氨基偶氮苯和联苯胺的检测方法 范围 本标准规定了使用气相色谱–质谱法测定化妆品中4-氨基偶氮苯和联苯胺的含量。 本标准适用于粉、霜、露、膏、乳、油、液类化妆品中4-氨基偶氮苯和联苯胺的测定。 本标准的浓度适用范围为0.5 mg/Kg～10 mg/Kg，4-氨基偶氮苯及联苯胺的检出限（3(）均为0.5 mg/Kg mg/Kg、2.5 mg/Kg。 原理 试样在氨水-氯化铵缓冲溶液（pH = 9.5）叔丁基甲醚超声后，使用硅胶-中性氧化铝混合填充的固相萃取小柱进行净化，叔丁基甲醚为淋洗液，经气相色谱分离、质谱检测器测定，定量。试剂及材料 除特别说明外，所有试剂均为分析纯；水为符合GB/T 6682规定的一级水。 标准物质：4-氨基偶氮苯，纯度≥99.0%。 标准物质：联苯胺，纯度≥98.5%。 正己烷：色谱纯。 甲醇：色谱纯。 叔丁基甲醚：色谱纯。 无水硫酸钠 氯化铵 氨水 氯化钠 硅胶：100～200目，使用前于160 ℃下烘12 h。 中性氧化铝：100～200目，使用前于180 ℃下烘12 h。 氨–氯化铵缓冲溶液：H=9.5的缓冲溶液。标准准确称10.0 mg准品10 mL容量瓶中，1 mg/mL。将标准溶液转移到安瓿瓶中于4℃保存 联苯胺标准储备溶液：准确称10.0 mg联苯胺准品于10 mL容量瓶中，加入少量甲醇溶解，并用甲醇定容至刻度，溶液浓度为1 mg/L。将标准溶液转移到安瓿瓶中于4℃保存。混合标准中间溶液：取一定量4-氨基偶氮苯和联苯胺的储备液，用甲醇稀释成混合标准中间溶液，溶液浓度为 mg/mL。将混合标准中间溶液转移到安瓿瓶中于4℃保存。混合4℃保存 气相色谱-质谱仪。 分析天平：感量0.1 g。 超声波振荡器。 离心机。 氮气吹。 固相萃取柱：径1 cm。 ：0 mL。滤膜：0.45 μm。K-D浓缩瓶：30 mL。 提取 称取0.5 g试样0 mL圆底螺口玻璃离心管（4.7），加入1 mL氨水–氯化铵缓冲溶液（），振荡混匀，加入10 mL叔丁基甲醚，于45 ℃下超声萃取15 min。按照类型进行1）对于化妆品如爽肤水、啫喱水等，样品冷却后，加入10 mL水5 g氯化钠，在分液振荡器上振荡10 min，取下，离心5 min，移取5 mL上层溶液，加入0.5 g无水硫酸钠静置 min，将无水硫酸钠除水后的溶液转移至30 mL K-D浓缩瓶（4.10）中溶液用缓慢的氮气流吹至近干叔丁基甲醚，叔丁基甲醚定容 mL，过0.45 μm滤膜供GC-MS测定。2）对于的化妆品如染发剂、指甲油等，样品冷却后，离心5 min，移出上层溶液，加入0.5 g无水硫酸钠静置 min；将溶液浓缩至1mL，浓缩过程中采用8 mL正己烷分三次淋洗K-D浓缩瓶内壁，用缓慢的氮气流将溶液吹至近干，加入 mL正己烷称取800 mg硅胶和1200 mg中性氧化铝（2:3，m/m），充分混匀，装入玻璃固相萃取柱，轻敲至实。使用前用4 mL叔丁基甲醚预淋洗，弃去淋洗液。将上述正己烷溶液转移至硅胶–中性氧化铝混装的柱，待样品过柱后，用15 mL叔丁基甲醚将目标物洗脱，30 mL K-D浓缩瓶（4.9）氮气吹扫、浓缩至近干浓缩过程中用8 mL分三次淋洗K-D浓缩瓶内壁，叔丁基定容至 mL，供GC-MS测定。 气相色谱-质谱检测参考条件 进样口温度300℃载气氦气纯度≥99.999%恒流方式流速1.0 mL/min。色谱柱DB-35 MS柱，30 m × 0.25 mm（i.d.）× 0.25 μm，或相当者柱温：初始温70 ℃，保持0.5 min以30 ℃/min升至270 ℃，保持2.0 min，再以25 ℃/min升至310 ℃。进样方式分流进样模式，分流比为71，进样量1.0 μL。离子源EI源电离能量：70 eV。色谱-质谱接口温度280℃四极杆温度150 ℃离子源温度230 ℃溶剂延迟3 min。方式全扫描/选择离子监测（Scan/SIM）同时采集模式，。4-氨基偶氮苯和联苯胺的保留时间特征离子序号 名称 保留时间min） 选择离子m/z） 丰度比 1 4-氨基偶氮苯 9.31 92*197, 120, 65 100 : 40 : 33 : 42 2 联苯胺 9.84 *184183, 185, 92 100 : 10 : 14 : 12 注：选择离子中带“*”的为定量离子。 根据中被测物质含量，选定适宜浓度标准工作，使待测样液中的响应值均在仪器检测的线性范围内。如果样液的检测响应值超出仪器检测的线性范围，可适当稀释后测定。 在气相色谱质谱条件下，标准物质的参考保留时间和气相色谱质谱选择离子色谱图见。 图1 4-氨基偶氮苯和联苯胺的气相色谱-质谱选择离子色谱图（0.5 mg/L）色谱峰：1.