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《现代仪器分析》 《现代仪器分析》 第3章 高效液相色谱 Chapter3 High Performance Liquid Chromatography, Chapter3 High Performance Liquid Chromatography, HPLC HPLC Contents Contents 1 第一节 HPLC的特点及基本理论 第一节 HPLC的特点及基本理论 2 第二节 高效液相色谱法的类型及原理 第二节 高效液相色谱法的类型及原理 3 第三节 高效液相色谱仪 4 第四节 其他现代分离技术简介 第四节 其他现代分离技术简介 §3.1 HPLC的特点及基本理论 §3.1 HPLC的特点及基本理论 1 第一节 高效液相色谱法的特点及基本理论 第一节 高效液相色谱法的特点及基本理论 ★教学目标 求 要 本 基 节 本 1.掌握HPLC基本理论及条件选择 求 求 求 要 要 要 本 本 本 基 基 基 节 节 节 本 本 本 2.掌握高效液相色谱法的特点 3.掌握高效液相色谱法和气相色谱法的 区别 ★重点与难点 1.高效液相色谱法的特点 2. HPLC基本理论及条件选择 一、液相色谱理论发展简况 什么是高效液相色谱法？ 高效液相色谱法：以气相色谱为基础，在经典液相色谱实 验和技术基础上建立的一种液相色谱法。又称现代液相色 谱。 色谱法的分离原理 溶于流动相(mobile phase) 中的各组分经过固定相时，由于与固定相 (stationary phase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和） 的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相 中流出。又称为色层法、层析法。 一、液相色谱理论发展简况 ①色谱法最早是由俄国植物学家茨维特 （Tswett ）在1906年研究用碳酸钙 分离植物色素时发现的，色谱法(Chromatography) 因之得名。后来在此基 础上发展出纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法。 ②液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差 输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长（常有几个 小时）。 ③高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography ，HPLC) 是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速 发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具 有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱 法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。又因分析速度快而 称为高速液相色谱法(High Speed Liquid Chromatography ，HSLP)。也称 现代液相色谱。 2 一、液相色谱理论发展简况 茨维特实验动画 二、高效液相色谱的特点 “三高” “一快” “一广” “三高” “一快” “一广” 高 压——压力可达150~300 atm 。色谱柱每米降压为75 atm 以上。 高 压 高 效——可达5000塔板每米。在一