第四章-药物定量分析与方法验证2.pptVIP

七、范围 是指达到一定精密度、准确度和线性、测试方法适用的高低限度或量的区间。 如原料药和制剂含量测定：应为测试浓度的80%～120%。 制剂含量均匀度检查：应为测试浓度的70%～ 130%。 溶出度或释放度中的溶出量测定：应为限度的±20%。 八、耐用性 是指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度。 典型的变动因素有：被测溶液的稳定性、样品提取次数、时间等。 HPLC变动因素有：流动相组成与pH，色谱柱，柱温，流速等。 GC变动因素有：色谱柱，固定相，担体、柱温、进样口和检测器温度等。 分析方法效能指标的具体应用： 1. 用于鉴别试验：只要求专属性、耐用性 2. 用于原料药中杂质测定和制剂中降解产物测定的方法： ①用于定量：除检测限不要求外，其余指标均要求。 ②限度检查：只要求检测限、专属性、耐用性 3. 原料、制剂的含量测定及溶出度测定：不要求检测限和 定量限，其余均要求。 第四节 生物样品分析方法的基本要求 一、常用样品的种类、采集和贮藏 二、生物样品分析前处理技术 一、常用样品的种类、采集和贮藏 （一）血液 测定药物浓度指测定血浆或血清中的药物浓度 采集→制备血浆或血清 贮藏：短期4℃、长期-20 ℃ （二）唾液 采集：自然分泌 贮藏： 4℃以下 （三）尿液 用于药物剂量回收研究，尿清除率、生物利用度等的研究 采集：自然排尿，时间尿，一定时间内排泄的尿液全部储存起来，记录体积 二、生物样品分析前处理技术 为什么要对生物样品进行前处理？ 蛋白质的去除方法？ 常用的分离、纯化方法？ 被测组分的浓集方法？ 为什么要进行前处理？ 存在形式多样：游离型药物、与蛋白质结合型药物、代谢物、葡萄糖醛酸苷、硫酸酯缀合物等 成分复杂：蛋白质、糖、脂肪、尿素 Na+、K+、X-等 （一）去除蛋白质 释放结合型药物、减少提取过程中乳化、保护仪器、提高灵敏度 加入与水混溶的有机溶剂 中性盐(常用硫酸铵、硫酸钠) 强酸（三氯醋酸、高氯酸、苦味酸） 加入含锌盐、铜盐的沉淀剂 酶解法 （二）缀合物的水解 酸水解/酶水解 （三）有机破坏 测定生物样品中的金属离子，常用HNO3-HClO4作为消解剂，一般得到高价态金属离子 （四）分离、纯化和浓集 使被测物在所用分析技术的检测范围内，常用萃取法 有机相——水相 药物 杂质 2（1） ： 1 多在酸碱性条件下萃取 液-液萃取法（LLE） （乙醚、氯仿） 有机相——水相 2（1） ： 1 药物 杂质 多在酸碱性条件下萃取 液-固萃取法（LSE） 相当于缩小的柱色谱法 浓集 末次萃取液尽量少 挥去萃取溶剂 （五）化学衍生化（略） 可使药物：具有能被分离的性质 提高灵敏度 增强稳定性 提高对光学异构体分离的能力 练习与思考 [A型题] 1．相对标准偏差表示的应是 A．准确度 B．回收率 C．精密度 D．纯净度 E．限度 2．表示两变量指标A与C之间线性相关程度常用 A．相关规律 B．比例常数 C．相关常数 D．相关系数 E．精密度 1～4 A．空白试验 B．对照试验 C．回收试验 D．鉴别试验 E．检测试验 1．以同量的溶剂替代供试品同法进行测定试验 2．在供试液中加入已知量的标准物或已知量的被测物后，同法进行测定试验 3．用已知量的纯物质作为试样，同法进行测定试验 4．取少许水杨酸，加水溶解，加三氯化铁试液，显紫堇色 A C D B [B型题] [X型题] 1．药物分析方法的效能指标有 A．检测限 B．耐用性 C．准确度 D．专属性 E．代表性 2．对药物中杂质进行检查时，要求所用的检查方法应具有 A．耐用性 B．专属性 C．检测限 D．准确度 E．线性与范围 3．用信噪比表示检测限时，信噪比一般应为 A．1∶1 B．2∶1 C．3∶1  D．4∶1 E．5∶1 第二节 定量分析样品的前处理方法 一、概述 1.结构特征与分析方法之间的关系 ①含卤素有机药物 R-X （F，Cl, Br, I ） 卤素与芳环相连