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第一节 微生物的酶 酶的概念:生物催化剂。细胞中自己制成,基本成分是蛋白质。 活性中心内的必需基团 六大类酶 酶与一般催化剂的共同点 在反应前后没有质和量的变化; 只能催化热力学允许的化学反应; 只能加速可逆反应的进程,而不改变反应的平衡点。 五、酶促反应动力学 Kinetics of Enzyme-Catalyzed Reaction 概念 研究各种因素对酶促反应速度的影响,并加以定量的阐述。 影响因素包括有 酶浓度、底物浓度、pH、温度、 抑制剂、激活剂等。 4) pH对酶反应速度的影响 5)激活剂对反应速度的影响 6)抑制剂对酶反应速度的影响 (一) 不可逆性抑制作用 * 概念 抑制剂通常以共价键与酶活性中心的必需基团相结合,使酶失活。 * 举例 有机磷化合物 ?? 羟基酶 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM) 重金属离子及砷化合物 ?? 巯基酶 解毒 -- -- -- 二巯基丙醇(BAL) (二) 可逆性抑制作用 * 概念 抑制剂通常以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合,使酶的活性降低或丧失;抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 竞争性抑制作用 抑制剂与底物的结构相似,能与底物竞争酶的活性中心,从而阻碍酶底物复合物的形成,使酶的活性降低。这种抑制作用称为竞争性抑制作用。 特点: ⑴ 竞争性I往往是酶的底物结构类似物; ⑵ 抑制剂与酶的结合部位与底物与酶的结合部位相同—— 酶的活性中心 ⑶ 抑制作用可以被高浓度的底物减低以致消除; 非竞争性抑制 * 反应模式 反竞争性抑制 * 反应模式 六、酶活性测定 酶促反应速度可在适宜的反应条件下,用单位时间内底物的消耗或产物的生成量来表示。 比活力(比活性):每单位(一般是mg)酶液中的酶活力单位数(酶单位/mg蛋白)。 实际应用中也用每单位制剂中含有的酶活力数表示(如:酶单位/mL(液体制剂),酶单位/g(固体制剂))。 对同一种酶来讲,比活力愈高则表示酶的纯度越高(含杂质越少),所以比活力是评价酶纯度高低的一个指标。 第二节 微生物的营养 从元素水平或营养要素水平分析,微生物的营养要求与摄食型的动物(包括人类)和光合自养型的绿色植物十分接近,它们存在着“营养上的统一性”,但可供其利用的食物种类要多得多。 元素水平:都需要20种左右,且以C、H、O、N、S、P六种元素为主,约占细胞干重的95%以上: 蛋白质由:C、H、O、N、S组成;核酸由C、H、O、N、P组成;糖类和脂类由C、H、O组成。 营养要素水平:则都在六大范围内,即碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水。 一、 微生物的化学组成 (二)碳源 种类? 有机物、无机碳化合物( CO2 、CO32+) 随微生物不同,各有偏好 最喜好的碳源是? (三)氮源——氮占细菌干重的12%—15% 氮源种类 分子态氮:固氮微生物以分子氮为唯一氮源:固氮菌、固氮蓝藻 无机态氮:硝酸盐、铵盐几乎所有微生物能利用 有机态氮:蛋白质及其降解产物 (六)能源 细菌的能源种类 化学能、光能 (1)无机营养细菌(自养菌) 无机(自养)—CO2、CO和CO32- 能否也利用有机物呢? ①光能自养细菌:这是一类能以CO2为唯一碳源或主要碳源并利用光能进行生长的的微生物,它们能以无机物如硫化氢、硫代硫酸钠或其他无机化合物为供氢体,使CO2固定还原成细胞物质,并且伴随元素氧(硫)的释放。 细菌只有紫硫细菌和绿硫细菌 较洁净的光照池塘无臭(H2S) 区 紫硫、绿硫细菌代谢方式 光照 CO2 + H2S → [CH2O](糖) + H2O + 2S↓ 菌绿素(与叶绿素大同小异) ② 化能自养细菌 什么是化能自养菌? 自养——碳源CO2 化能——以 ?物质氧化产能 S、H2S、H2、NH3、Fe ⑵ 有机营养细菌(异养菌) 有机(异养)——以有机物为碳源 提问:自养、异养菌哪种繁殖快? “吃砖头和吃粮食的区别” 异养菌是有机污水处理的主角 ②. 光能异养细菌(无氧有光) 光能+色素 有机物 + CO2 → 菌体 [CH2O] 小分子有机物碳源 主要指红螺菌(有氧无光时可化能异养生存) 提问:人工投加光合细菌(PSB,红螺菌)有利于水产养殖,原因? 以上四种营养类型划分不是绝对的: 1.如红螺菌既可利用光能,也可利用化能 2.氢单胞菌是异养和自养的过渡型(称兼性自养型) 自养与异养的区别不在于能否利用CO2,而在于是否以CO2或碳酸盐为唯一的碳源。自养型以无机
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