一、实验前要做好实验预习，进实验室只带必要的文具、讲义，并穿工作服.pptVIP

医学微生物学 实 验 一 细菌形态学  （一）实验前要做好实验预习，进实验室只带必要的文具、讲义，并穿工作服。 （二）实验室内应保持清洁、安静，实验时要认真严肃，禁止抽烟、饮食和开玩笑。 五、细菌的特殊构造： 1、鞭毛 2、荚膜 3、芽胞 4、菌毛 * 本次实验内容 一、实验室规则 二、油镜的使用 三、细菌的基本形态和特殊结构的观察 四、革兰氏染色法 五、自然界中细菌的分布 一、实 验 室 规 则 （三）爱护实验器材，注意节约实验材料，实验室内任何物品不得带出室外。 （四）注意安全，若带菌材料污染桌面、地板、书籍和衣物或误吸入口，应立即报告教师进行处理。 （五）实验中待培养的材料应放在培养区；实验用过的带菌材料如吸管、玻片等应放在消毒缸、消毒箱等消毒区，不得放在桌上或冲洗于水槽内。 （六）实验完毕，桌面应整理清洁，洗手后方可离室。值日同学负责湿性打扫实验室，并关好水、电、门窗。 二、油镜的使用 (一)、油镜头的识别 油镜头的下缘，一般刻有一黑圈，标有油 90、100、oel、oil等字样。 显微镜的接物镜有低倍镜头，高倍镜头和油镜头，其中油镜头的放大倍数最大。 (二）油镜的原理： 滴镜油后可以增加油镜视野的亮度。 （三）镜检要领 把载玻片固定于载物台上，使油镜头对准镜筒。于载玻片上滴一小滴液体石腊，眼睛从镜筒侧面看，旋转粗调节器，使镜筒下降浸入镜油并贴近标本，但勿触及玻片。 镜检完毕后，把镜筒升高，用擦镜纸把油镜头上的镜油擦净。 （四）油镜的保护办法 细菌的基本形态可分为球菌、杆菌、螺形菌（包括弧菌）三类。 三、细菌基本形态的观察 1．球菌： 如葡萄球菌经结晶紫染色后为球状，常堆集成葡萄串状，呈紫色。 葡萄球菌 肺炎球菌 链 球 菌 2．杆菌： 如大肠杆菌经番红染色后呈淡红色杆状，两端钝圆，散在排列。 大肠杆菌 3．螺形菌： 如霍乱弧菌经稀释复红液染色后呈红色弧形，菌体微弯，如逗点状，或呈眉毛状，散在排列。幽门螺杆菌呈螺旋状、U状、S状及海鸥展翅状。 幽门螺杆菌 四、革兰氏染色 （一）细菌涂片的制作 （二）染色： 单染色法 复染色法 革兰氏染色法 抗酸染色法 （一）细菌涂片标本的制作 1．涂片： 取清洁无油载玻片一张，将接种环用火焰烧红灭菌，待冷后取一环菌液轻轻涂抹在玻片上，制成直径约1cm大小薄层，然后将接种环灭菌。 2．干燥： 涂片置室温自然干燥，必要时可将标本面朝上，放在离火焰较高处微微烘干，但切勿在火焰上直烤。 3．固定： 标本面朝上，用钟摆样速度来回通过火焰三次。 （二）革兰氏染色法步骤 1．初染：在上述已固定的涂片 上，滴加结晶紫染液，染色1分钟，水洗。 2．媒染：滴加革兰氏碘液，作用1—3分钟，水洗。 3．脱色：滴加 95％酒精，并频频摇动玻片，至无紫色脱出为止（约20秒），水洗。 4．复染：加番红染液，复染半分钟，水洗，用吸水纸印干后，油镜检查。 1 初染: 结晶紫染色液, 1分钟 媒染: 革兰氏碘液, 1分钟 脱色: 95%酒精, 15-20秒 复染: 番红染色液, 30秒 （三）革兰氏染色法 1、结果观察： 革兰氏阳性菌---兰紫色 革兰氏阴性菌---红色 2、原理 3、意义 *