第1章色谱介绍.pptVIP

张静 食品与生物工程学院;高效液相色谱仪;Contents;;1.1 色谱分析法概述;1.1 色谱分析法概述;流动相 石油醚 混合色素 叶绿素 叶黄素 胡萝卜素 分离组分;表1-1 色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作;1.1 色谱分析法概述;按流动相状态;;;为提高组分的分离效能和高选择性，采取多种技术措施，根据色谱技术的性质不同而形成了多种色谱分类;冲洗法;;1.1.4 色谱法的局限性;1.2 色谱过程和相关术语;1.2 色谱过程和相关术语;1.2 色谱过程和相关术语;1.2 色谱过程和相关术语;色谱峰：有组分流出时，出现的峰状微分流出曲线。 基线：当没有组分进入检测器时，色谱流出曲线是一条只反映仪器噪声随时间变化的曲线。 峰高：色谱峰最高点至峰底的垂直距离。 峰宽：沿色谱峰两侧拐点处所做的切线与峰底相交两点之间的距离。;半高峰宽：在峰高为0.5h处的峰宽GH，常用符号Wh/2表示。 峰面积：组分的流出曲线与基线所包围的面积（即峰与峰底之间的面积） 标准偏差：在峰高0.607h处峰宽EF的一半，成为标准偏差，常用符号σ表示，W=4σ。;1.2.2 基本术语2.保留值;保留时间：组分从进样到出现峰最大值所需的时间，常用符号tR表示。 死时间：不被固定相滞留的物质（如空气等）的保留时间，常用符号tM表示。 调整保留时间：组分保留时间减去死时间后的值，常用符号tR’表示。;1.2 色谱过程和相关术语;1.2 色谱过程和相关术语;1.2 色谱过程和相关术语;1.2 色谱过程和相关术语;1.2 色谱过程和相关术语;1.3.1 吸附色谱法（Liquid-Solid Chromatography，LSC ） 1.3.2 分配色谱法（Partition Chromatography，PC ） 1.3.3 离子交换色谱法（Ion-Exchange Chromatography，IEC） 1.3.4 空间排阻色谱法（Size Exclusion Chromatography，SEC ）;1.3 基本类型色谱法的分离机制;各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心，吸附剂一般与待分离化合物的极性官能团相互作用;一般采用含水量10-20%的硅胶（硅胶的吸附活性取决于含水量，当含水量小于1%时活性最高，大于20%时吸附活性最低）。用硅胶进行色谱分离时，要提前进行活化和纯化。纯化即降低硅胶活性，实验表明，硅胶加入4-20%水后，表面活性部位被纯化，样品溶???在吸附剂上的吸附和解吸过程加快，同时传质作用得到改善，最终柱效大幅提高。 ;1.3 基本类型色谱法的分离机制;1.3 基本类型色谱法的分离机制;1.3 基本类型色谱法的分离机制;1.3 基本类型色谱法的分离机制;1.3 基本类型色谱法的分离机制;1.3 基本类型色谱法的分离机制;1.3 基本类型色谱法的分离机制;;色谱法在食品工业中的应用;采用非抑制性离子交换色谱-间接紫外光度检测法，可在7min内测定啤酒、饮料、食盐和香肠中的Cl-，NO2-，NO3-，I- ， SO32- SO32-：亚硫酸盐用途广泛，农业上用作抑制剂，促进水稻、小麦、玉米、油菜、棉花等农作物增产，食品工业作为食物、果品和饮料的防腐剂。许多国家严格规定其在产品中的含量水平，美国食品与药品管理局规定，任何产品亚硫酸盐含量等于或超过10mg/kg的必须加以标注;采用非抑制性离子交换色谱和离子排斥色谱法都可用来测定有机酸。通过对不同等级甜菜糖中无机阴离子和有机酸的分析，可把无机阴离子的含量作为判断甜菜糖结晶质量的标准，而把有机酸含量作为判断储藏温度和湿度是否适宜的标准。果汁中乙酸、乳酸含量的增加可作为微生物变化的标志。;形态分析，特别是金属和半金属有机化合物的分析是近年来分析化学的一个热点。离子色谱可分离同种元素不同的离子形式，是进行形态分析的有力工具。许多有机锗化合物都具有抗癌效果，但是其毒性具有差异，因此对结构相似的有机锗化合物进行分析十分重要。 针对日本等国报道“锗中毒”事件。采用离子排斥色谱-柱后衍生光度法，测定了保健饮品中的无机锗和锗132。;目前各种饮料和食品中人工合成甜味剂超限量和超范围使用的问题十分严重，以廉价甜味剂代替价高质优甜味剂的事情也时有发生。采用色谱方法可同时测定甜味素、甜蜜素、安赛蜜、糖精钠和柠檬酸。;由于糖类化合物的紫外吸收很弱，因此糖类的分析一直是分析化学的一个难点。采用阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定糖类，是糖类分析的一个突破性进展。测定速溶咖啡中11种糖的方法已正式颁布执行（方法号：995.13）。该法已成功地用于三大类7000多种咖啡的分析，通过大量样本的分析，确定总木糖含量超过0.4%的速溶咖啡即可认为掺假。采用类似方法对大量同种食品进行分析，可总结出该食品中某些糖的正常值范围或该食品的特