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- 2017-08-23 发布于河南
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血型鉴定与抗体筛选与血液交叉
输血和输血技术试验
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实验内容
血型鉴定
抗体筛选
交叉配血
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血型鉴定
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目的
掌握红细胞ABO血型及Rh血型鉴定
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原理
ABO血型鉴定:根据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原,以及血清中有无抗A及抗B,可以将血型分为A型、B型、AB型、O型四种,利用红细胞凝集实验通过正定型、反定型准确鉴定ABO血型。
Rh血型鉴定: IgM型盐水抗D试剂能够与D阳性红细胞在盐水介质中形成肉眼可见的凝集。
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原理
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试剂
抗A及抗B血清(商品试剂)
5% A型和B型红细胞(试管法)
10% A型和B型红细胞(玻片法)
IgM型盐水抗D试剂
标本 抗凝静脉血 EDTA-K2
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红细胞ABO血型鉴定(试管法正定型)
标记两支干净的试管-A和-B
在标记为-A的试管中加1滴抗A试剂。
在标记为-B的试管中加1滴抗B试剂。
在每个试管中各加入5%受检者红细胞悬液
(1份压积红细胞+19份0.9%盐水)
轻轻混匀,1000g离心1分钟。
检查上清液是否有溶血。
轻轻重悬细胞扣,检查凝集。
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红细胞ABO血型鉴定(试管法反定型)
标记两支干净的试管Ac和Bc
每管加入2滴受检者血清。
在标记Ac的试管中加入1滴5%A型试剂红细胞。
在标记Bc的试管中加入1滴5%B型试剂红细胞。
轻轻混匀,1000g离心1分钟。
检查上清有无溶血。
轻轻重悬细胞扣,检查凝集。
判断并记录结果。
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红细胞ABO血型鉴定(玻片法)
在标记的玻板上分别加一滴抗A、抗B。
各加一滴10%受检者红细胞悬液
(1滴压积红细胞+9滴0.9%盐水)
轻轻混匀,室温放置2-15分钟。
观察并记录结果:凝集为阳性结果,不凝集为阴性结果,对结果有怀疑,应用试管法重新实验。
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红细胞Rh血型鉴定
试管法
标记一支75×12mm的试管
加入抗D血清1滴,
加1滴5%的待检细胞。
轻轻混匀,1000g离心1分钟,或3000r/min,15秒。
检查是否溶血,然后轻轻重悬细胞扣,检查凝集
玻片法
在玻板上标记待检红细胞编号。
加入抗D血清1滴于标记玻片中。
将35-45%的待检细胞1滴滴入玻片并混匀。
室温放置2分钟左右观察结果。
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结果判读(ABO血型鉴定)
正定型
反定型
血型
抗A
抗B
A细胞
B细胞
O细胞
-
-
+
+
-
O
+
-
-
+
-
A
-
+
+
-
-
B
+
+
-
-
-
AB
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结果判读(Rh血型鉴定)
阳性对照
阴性对照
待检细胞
结果
+
-
+
+
+
-
-
-
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报告方式
XXX型,Rh +/-
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注意事项
玻片、试管都要标记!!!A及B标准血清绝对不能相混,不要依靠用染料颜色标记血清。
所用玻片、试管实验前必须清洗
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