虎皮楠生物碱daphnioldhaninE诱导HepG2细胞-天津中草药杂志社.PDF

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 9 期 2012 年 9 月 • 1789 • 虎皮楠生物碱 daphnioldhanin E 诱导 HepG2 细胞类凋亡研究 王 蓓，戎瑞雪，王 海，王永丽，张雷芳，曹志然* 河北大学基础医学院，河北 保定 071000 摘 要：目的 研究虎皮楠生物碱 daphnioldhanin E 诱导人肝癌 HepG2 细胞死亡的机制。方法 HepG2 细胞用 daphnioldhanin E （10、30 μg/mL ）处理后，瑞姬氏染色法观察细胞形态变化，DNA 琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况，MTT 法检测细胞凋亡 抑制剂 Z-VAD- FMK 对 daphnioldhanin E 抗癌活性的影响，分光光度法检测 caspase-3 酶活性的变化。结果 瑞姬氏染色显 示，HepG2 细胞经 daphnioldhanin E 处理 48 h 后，细胞体积增大，细胞核清晰可见，周围出现大量的胞浆空泡，但细胞膜仍 保持完整；DNA 琼脂糖凝胶电泳结果可见大量 50 ～200 bp 的片段；MTT 法检测结果显示 Z-VAD-FMK 不能阻断 daphnioldhanin E 对 HepG2 细胞增殖的抑制作用；分光光度法测定显示，daphnioldhanin E 给药组与对照组 HepG2 细胞 caspase-3 酶活性无明显变化，表明 daphnioldhanin E 对 HepG2 细胞的杀伤作用与 caspase-3 激活通路无关。结论 Daphnioldhanin E 可能通过类凋亡方式明显诱导 HepG2 细胞程序性死亡，该过程不依赖于 caspase-3 途径。 关键词：虎皮楠；daphnioldhanin E ；HepG2 细胞；类凋亡；caspase-3 中图分类号：R282.710.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)09 - 1789 - 05 Paraptosis in HepG2 cells induced by daphnioldhanin E from Daphniphyllum oldhami WANG Bei, RONG Rui-xue, WANG Hai, WANG Yong-li, ZHANG Lei-fang, CAO Zhi-ran College of Basic Medicine, Hebei University, Baoding 071000, China Abstract: Objective To investigate the mechanism of HepG2 cell death induced by daphnioldhanin E from Daphniphyllum oldhami . Methods The HepG2 cells were treated with daphnioldhanin E (10 and 30 μg/mL), and the morphologic changes of cells were observed by Wright-Giemsa staining. DNA agarose gel electrophoresis, MTT assay, and spectrophotometric method were conducted to detect cell apoptosis, effect of Z-VAD-FMK on antitcancer activity of daphnioldhanin E, and activity changes of caspase-3, respectively. Results Wright-Giemsa staining demonstrated that the volume of HepG2 cell increased after 48 h treatment with daphnioldhanin