HPLC法测定风痛安胶囊中姜黄素含量.docVIP

HPLC法测定风痛安胶囊中姜黄素含量摘 要：目的：建立风痛安胶囊中姜黄素的含量测定方法。方法：采用Zorbax Eclipse XDB-C【sub】18【/sub】（150mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-4%冰醋酸溶液（48∶52）；检测波长为430nm；柱温30℃。结果：姜黄素进样量在0.0468～0.935μg范围内呈良好的线性关系（r0.9994），样品平均回收率为96.84%，RSD1.61%。结论：此方法操作简便、专属性强、灵敏度高，重现性好，可用于风痛安胶囊中姜黄素的含量控制。 关键词：HPLC法；风痛安胶囊；姜黄素 中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1673-7717（2011）04-0907-02 收稿日期：2010-11-21 作者简介：黄南（1978-），女，浙江台州人，主管中药师，研究方向：中药配方与质量分析。 通讯作者：陈宗良（1978-），男，浙江永康人，主管中药师，研究方向：中药配方与质量分析。 风痛安胶囊收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第4册，由防己、通草、桂枝、姜黄等12味中药组成【sup】［1］【/sup】，具有清热利湿，活血通络。用于急、慢性风湿性关节炎，慢性风湿性关节炎活动期。姜黄具有破血行气、通经止痛之功，用于风湿肩臂疼痛、跌扑肿痛【sup】［2］【/sup】，而姜黄素是姜黄中的主要成分，因此建立风痛安胶囊中姜黄素的含量测定方法加以控制质量具有实际意义。本文建立了风痛安胶囊中姜黄素的含量测定方法，为更加有效的控制风痛安胶囊的质量提供了参考。 1 仪器与试药 Agilent 1200高效液相色谱仪，梅特勒XS105DU分析天平（起始0.00000g）。姜黄素（购于中国药品生物制品检定所，批号：110823-200603）；风痛安胶囊（标示为吉林省辉南辉发制股份有限公司生产）。水为娃哈哈纯净水，乙腈为色谱纯（默克公司），其余为分析纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C【sub】18【/sub】（150×4.6，5μm）；流动相：乙腈―4%冰醋酸溶液（48：52）；检测波长为430nm；柱温30℃；流速1.0mL/min；进样量5μL。理论板数按姜黄素峰计算大于5000。 2.2 对照品贮备液的制备 称取姜黄素对照品0.01169g，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。 2.3 供试品溶液的制备 取本品内容物，研细，称取约2.5g，精密称定，精密加甲醇25mL，称定重量，超声处理30min，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液，即得。 2.4 线性关系考察 精密量取上述对照品贮备液1mL，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液。再精密吸取对照品溶液1、3、5、10、15、20μL分别注入液相色谱仪（每份重复进样2次），按上述色谱条件测得峰面积。以峰面积为纵坐标，以姜黄素进样量为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y8445.4X+182.43（r0.9994），表明进样量在0.0468～0.935μg范围内呈良好的线性关系。 2.5 精密度 以重复性试验考察，分别称取编号为01的供试品6份，按“2.3”项下方法制备并测定含量，结果RSD1.42%；再分别精密吸取对照品溶液5μL重复进样6次，结果其峰面积RSD0.37%，表明精密度良好。 2.6 稳定性 取供试品溶液于制备后2、4、8、12、24、32h分别进样5μL，峰面积值的RSD1.73%，表明样品溶液在32h内稳定。 2.7 回收率 精密称取编号为01的供试品（含姜黄素：0.40mg/g） 6份，分别精密加入对照品贮备液适量，再“2.3”项下方法制备并测定含量，计算样品加样回收率（结果见表1）。平均加样回收率为96.84%，RSD1.61%。 2.8 阴性空白试验 取处方中除姜黄外的另11味药按制法制成阴性样品，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液，并按上述色谱条件测定。结果在姜黄素对照品峰表2 样品中姜黄素的含量测定结果（n4） 2.9 样品的含量测定 3批样品按“2.3”项下方法和上述色谱条件，以峰面积计算姜黄素的含量，结果见表2。 3 讨 论 （1）文献检索未见有风痛安胶囊中姜黄素的HPLC含量测定方法的报道，而姜黄具有破血行气、通经止痛的功效；是风痛安胶囊中清热利湿、活血通络作用的主要体现，故参照药典姜黄项下方法【sup】［2］【/sup】选择乙腈-4%冰醋酸溶液（48∶52）作为流动相，结果甚佳，分析时间在20min左右，比较适中，适合日常分析。 （2）提取