pH对补骨脂中补骨脂素及异补骨脂素浸出率影响.docVIP

pH对补骨脂中补骨脂素及异补骨脂素浸出率影响摘要：目的：观察pH对补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素浸出率的影响。方法：用不同pH值水溶液对补骨脂进行提取，通过HPLC梯度洗脱测定补骨脂素和异补骨脂素的含量。结果：在实验pH值下，补骨脂素和异补骨脂素的含量均有变化。结论：pH影响补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的浸出率。 关键词：pH；补骨脂素；异补骨脂素 中图分类号：R282．710．2　文献标识码：A　文章编号：1673―7717(2007)05-0931-02 补骨脂为豆科植物补骨脂(Psoralea cory．)的干燥成熟果实，主产于四川、河南等地，性温，味辛、苦。具有温肾助阳、纳气、止泻之功效。用于治疗阳痿遗精、腰膝冷痛、肾虚作喘、五更泄泻、白癜风、斑秃等症。 补骨脂的主要成分为补骨脂素和异补骨脂素[1]，可采用水提或醇提的方法提取。文献研究表明，补骨脂中的部分补骨脂素和异补骨脂素可能以苷的形式存在[2]，在提取过程中受到酶的作用而分解为游离的补骨脂素和异补骨脂素。本文利用不同pH值的水溶液对补骨脂进行了提取，以考察其对补骨脂素和异补骨脂素浸出率的影响。 1　仪器材料试剂 高效液相色谱仪：LC－10Atvp(日本岛津)，SPD－lOAtvp紫外检测器(日本岛津)，中北工作站。 补骨脂药材来自安国药材市场，经辽宁中医药大学鉴定教研室翟延军教授鉴定为补骨脂的干燥成熟果实。补骨脂素和异补骨脂素对照品(中国药品生物制品鉴定所，供含量测定用)，甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。 2　方法与结果 2．1　色谱条件 Agilent Eclipse XDB―C18(4．6mm×150mm，5um)ODS色谱柱，甲醇一水从0min(25：75)到60min(20：80)非线性梯度洗脱。体积流量为1．0mL／min，检测波长为330min，柱温为32℃。 2．2　对照品溶液的制备 精密称取补骨脂素和异补骨脂素对照品适量，以甲醇溶解，制成lmL含O．0582mg补骨脂素、0．0459mg异补骨脂素的对照品混合溶液，备用。 2．3　供试品溶液的制备 精密称取5．Og补骨脂药材，分别用10mL的水、0．1mmol／LHCl、0．01 mmol／LHCl、0．001 mmol／LHCl溶液浸泡过夜。用90mL甲醇回流提取浸泡物2h。滤液转移至100mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，滤液过0．45um微孔滤膜作为供试品溶液。 2．4　方法学考察 2．4．1　线性范围考查吸取不同浓度的对照品溶液，分别进样10uL，按“2．1”项所述色谱条件操作，测定峰面积。以进样量为横坐标(mg)，以峰面积为纵坐标，得线性方程。 补骨脂素：y=100006X+24945，r＝0．9994；进样量在0．058～0．293ug范围内线性关系良好。补骨脂素：Y=931315X－2579．2，r=O．9994。进样量在0．046～O．229ug范围内线性关系良好。 2．4．2　精密度实验精密称取002号样品，经索氏提取，滤液定容至100mL，精密吸取10ul，连续进样5次，测定补骨脂素和异补骨脂素的含量，补骨脂素含量RSD为2．50％，异补骨脂素含量RSD为2．30％。结果表明方法精密度良好。 2．4．3　稳定性实验精密称取002号样品，经索氏提取，滤液定容至100mL，分别在0、2、4、8、16h精密吸取10ul进样，测定补骨脂素和异补骨脂素的含量，结果表明16h内样品稳定性良好，补骨脂素含量RSD为0．2％，异补骨脂素含量RSD为0．5％。 2．4．4　重现性实验　分别精密称取002号样品5份，经索氏提取，滤液定容至100mL，精密吸取10uL进样，测定补骨脂素和异补骨脂素的含量，结果表明方法重现性良好，补骨脂素含量RSD为2．20％，异补骨脂素含量RSD为1．90％。 2．4．5　回收率实验采用加样回收法试验。精密称取002号样品(补骨脂素含量O．728％，异补骨脂素含量O．521％)0．5g各5份，分别加入补骨脂素对照品溶液(0．49mg／mL)7．0mL，异补骨脂素对照品溶液(0．46mg/mL)7．0mL，按供试品溶液制备法操作，计算补骨脂索平均回收率为96．71％(n=5)，RSD=O．29％，异补骨脂素平均回收率为97．20％(n=5)，RSD=0．35％。 2．5　各供试品补骨脂素和异补骨脂素的含量测定 精密吸取10ul供试品溶液注入液相色谱仪，采用外标法计算补骨脂素和异补骨脂素的含量，结果见表1。 从实验结果来看，pH对对异补骨脂素的含量影响比对补骨脂素的含量影响大。从HPLC谱图来看，在不同pH值下，HPIC