丹参铬合剂对实验性高脂血症模型动脉粥样硬化干预作用.doc

丹参铬合剂对实验性高脂血症模型动脉粥样硬化干预作用摘要：目的：丹参和无机铬在一定条件下制成丹参铬合剂，利用高脂喂养诱发动脉粥样硬化动物模型，探讨丹参铬合剂对鸡动脉粥样硬化的干预作用。方法：70天龄西德Roman鸡32只，随机分为4组，丹参组、丹参铬组造模同时给药，正常对照组、动脉粥样硬化(AS)模型组等容量生理盐水灌胃。12周后，采用酶学法测定血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量，肝脏、心脏组织TC含量。解剖显微镜观察、测定主动脉内膜脂质斑块面积，计算其占主动脉总面积的百分数。高倍光学显微镜观察冠状动脉血管总数和各级病变血管数，计算冠状动脉受累百分数。透射电镜观察主动脉内皮细胞、平滑肌细胞病理变化。结果：丹参铬组血清TC含量明显低于AS模型组，有显著性差异(P0.05)；丹参铬组血清TC含量明显低于AS模型组，有显著性差异(P0.05)，但仍高于正常对照组。见表1。 2.2对肝脏、心脏组织TC含量及对主动脉和冠状动脉病理变化的影响：肝脏、心脏组织TC含量测定结果表明，AS模型组动物肝脏、心脏组织TC含量较正常对照组明显升高(P0.01)；丹参组、丹参铬组肝脏、心脏组织TC含量均低于AS模型组，有显著性差异(P0.05)，尤以丹参铬组心脏组织TC含量明显低于AS模型组(P0.01)。 病理大体形态观察，AS模型组主动脉内膜明显增厚，表面可见黄色、微隆起内膜的脂斑、脂纹，散在分布于主动脉后壁及其分支开口处，苏丹Ⅳ染色阳性。丹参组主动脉内膜有少量脂斑，稀疏分布于主动脉弓部，丹参铬组主动脉内膜脂斑形成明显减少，苏丹Ⅳ染色后仅见针帽头大小的阳性斑点。丹参组、丹参铬组主动脉AS斑块面积和冠状动脉受累百分率明显低于AS模型组(P0.05或P0.01)，见表2。 2.3对血管内皮细胞功能、结构和平滑肌细胞表型改变的影响：电镜下观察，AS模型组内皮细胞呈收缩状，胞体短、胞浆致密，核固缩，细胞间隙增大出现深大的缺口。部分内皮细胞崩解、脱落，形成大小 不一的细胞脱失区，区内有血小板、白细胞、红细胞和细胞碎片、纤维素附着，周边部隆起，状似火山口。内皮细胞脱失区下方，平滑肌细胞集聚，增殖的平滑肌细胞表型改变，富含粗面内质网和核糖体，高尔基体发达，肌丝较少。平滑肌细胞内外可见多量脂质成分，周围有大量胶原纤维分布。 丹参组部分内皮细胞出现不同程度变性，单个内皮细胞松解、翘起，呈局灶性脱落，细胞间隙扩张。内皮细胞下可见少量平滑肌细胞，胞质内有不等量脂质成分，间质内有脂质沉积。丹参铬组内皮细胞结构较完整，有丰富的微绒毛，胞质内可见饮液小泡和细胞器。部分内皮细胞呈轻度收缩状，细胞间连接略疏松。内膜下可见结构较正常平滑肌细胞，平滑肌细胞核的两端可见较小空泡。间质内未见脂质成分。 3、讨论 AS是一种由多因素参与的多基因病变，高脂血症是AS发生的最危险因素，通过脂质过氧化；低密度脂蛋白(LDL)形成氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)。ox-LDL对内皮细胞毒性增强，造成内皮细胞损伤；吸引、促进病变部位单核细胞浸润，吞噬脂质，形成泡沫细胞；诱导单核细胞与内皮细胞粘附，激活内皮细胞核因子(NF-kB)，发生核转位的NF-kB参与调节多种与AS发生相关的细胞介质基因表达，刺激血管壁平滑肌细胞增殖、表型改变，并促进平滑肌细胞向内膜迁移，参与AS的发生、发展。 血管内皮细胞(vascular endonthelial cell，VEC)是介于血液与血管壁之间的屏障。VEC损伤是动脉粥样硬化发病的关键环节。ROSS指出：AS的发生是由于VEC和内皮损伤后中膜平滑肌细胞(VSMC)受各种危险因子特别是ox-LDL的损伤，而使局部产生的一种过度的慢性炎症反应。VEC结构受损和功能改变，导致血管屏障的功能损害，使血液中LDL和单核细胞更易沉在内皮下。ox-LDL引起的炎症反应使内皮细胞超微结构的损害，细胞膜表面有孔隙，微绒毛僵直断裂，分布不规则。本实验应用透射电镜观察AS模型组，发现内皮细胞呈收缩状，胞浆致密，核固缩，细胞间隙增大出现深大缺口。内皮细胞有崩解、脱落，形成大小不一的细胞脱失区，区内有血小板、白细胞、红细胞和细胞碎片、纤维素附着。 VSMC迁移到内膜下，表型发生改变，产生AS斑块中纤维帽张力所必需的Ⅱ、Ⅲ型胶原纤维。VSMC在血管内膜增殖，吞噬脂质，合成胶原纤维是AS斑块形成重要病变之一。本实验电镜观察发现，AS模型组内皮细胞脱失区下方，VSMC集聚，增殖的VSMC呈分泌表型改变，胞质内含有较多粗面内质网和核糖体，高尔基体发达，产生胶原纤维、蛋白多糖和糖蛋白，细胞周围有大量胶原纤维分布。胞质内仅含少量肌丝，缺乏收缩功能。VSMC吞噬沉积在内膜下TC、LDL，形成肌源性泡沫细胞，细胞内外