复方银杏颗粒对拟血管性痴呆大鼠脑组织SOD活力及形态学影响.docVIP

复方银杏颗粒对拟血管性痴呆大鼠脑组织SOD活力及形态学影响郭建生　刘　冰　潘朝旺 摘　要：目的：观察复方银杏颗粒对拟血管性痴呆大鼠脑组织SOD活力和海马形态学的影响。方法：通过反复夹闭双侧颈总动脉同时腹腔注射硝普钠制造拟血管性痴呆大鼠模型，测定大鼠脑组织中SOD活力，并在光镜下观察海马细胞形态学变化。结果：与模型组比较，复方银杏颗粒组SOD活力明显增强，差异有统计学意义，并且复方银杏颗粒组神经细胞损伤有不同程度减轻。结论：复方银杏颗粒对缺血性血管性痴呆大鼠大脑有一定保护作用，其机制可能与增强脑组织SOD活力，提高抗氧化能力有关。 关键词：复方银杏颗粒；血管性痴呆；超氧化物歧化酶(SOD)；海马；形态学 中图分类号：11285.5 文献标识码：A 文章编号：1673－7717(2007)07－1337－03 血管性痴呆(VD)是由各种脑血管疾病引起的脑功能障碍而产生的获得性智能损害综合症，其中缺血性脑血管病所致的痴呆约占血管性痴呆的半数以上。本实验复制了大鼠脑缺血再灌注导致智能障碍模型，并用复方银杏颗粒进行治疗，通过测定大鼠脑组织中SOD活力和海马细胞形态学观察，探讨缺血性血管性痴呆的发病机理及复方银杏颗粒对该病治疗的作用机理。 1　材料与方法 1．1 材料 (1)动物：SD大鼠，体重270－300g，80只，雌雄各半，由长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供，合格证号：SCXK(湘)2006－000l。实验条件下自然饮食，适应环境1周后进行实验；(2)药品和试剂：复方银杏颗粒由银杏叶提取物、川芎、淫羊藿等组成，实验用于浸膏为9.318生药/g，由湖南中医药研究所提供。都可喜，法国施维雅药厂生产，批号：5A0153，为阳性对照药。实验时以上药物用蒸馏水配成混悬液。考马斯亮兰蛋白测定试剂盒SOD测试试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。(3)主要仪器：UV－1600型分光光度计：北京瑞利公司；DM LB2型双目显微镜：德国LEICA公司；325型石蜡切片机：英国Shandon公司。 1．2 方法 1．2．1 VD动物模型制作，大鼠以10％水合氯醛350mg/kg腹腔注射，麻醉后，仰卧位固定于手术台上。75％酒精消毒颈前皮肤，行颈正中切口，分离双侧颈总动脉并穿线，硝普钠按2．5mg/kg腹腔注射，立即用无创动脉夹夹闭双侧颈总动脉10min，松开动脉夹再通10min，再夹闭10min，撤线，缝合切口，术中灯照保温。假手术组只分离颈总动脉，不夹闭，30min后缝合。术后每日肌注庆大霉素5mg/kg，连续5天。 1．2．2 动物分组随机抽取10只(雌雄各半)作为假手术组，其它为手术组。术后第3天，将存活的手术组大鼠中的50只随机分为5组(复方银杏低、中、高剂量组、都可喜组、模型组)，加上10只假手术组小鼠，共6组。复方银杏低、中、高剂量组灌服复方银杏颗粒水溶液，剂量分别为1.46、4.38、13.14生药/kg，相当于临床用量的1、3、9倍，都可喜组灌服都可喜水溶液14.4mg/kg，假手术组和模型组给予等容量蒸馏水。每天1次，共14天。 1．2．3 脑组织SOD活性测定将大鼠处死，取左半脑，称重后加9倍重量生理盐水制备10％匀浆，严格按试剂盒说明进行测定SOD活性。 1．2．4 海马形态学观察取右半脑，置于4％多聚甲醛溶液中固定24h，常规脱水，浸蜡，石蜡包埋，连续冠状切片6μm脚，HE染色，光镜下观察。 1．3 统计学处理 数据用x±s表示，两组间比较采用t检验。 2　结　果 2．1 对拟血管性痴呆大鼠脑组织SOD活力的影响 见表1，与假手术组比较，模型组大鼠SOD活力显著降低(P0.01)，复方银杏颗粒各剂量组均能提高拟血管性痴呆大鼠脑组织的SOD活力，与模型组比较有显著差异，其中复方银杏颗粒低剂量组有非常显著的差异(P0．01)，提示复方银杏颗粒有抗氧化的作用，对大脑缺血损伤有保护作用。都可喜也能明显提高脑组织SOD活力。 2．2 海马CA1区形态学观察 假手术组：海马CA1区锥体细胞完整清晰，细胞排列整齐致密，核仁明显。模型组：海马CA1区锥体细胞明显减少且变形皱缩，大小不规则，排列紊乱，可见明显核固缩，胞质浓染，有的细胞旁有空染区。复方银杏颗粒高剂量组：锥体细胞较清晰，排列整齐致密，偶见核固缩，与假手术组比较无明显差异。复方银杏颗粒中剂量组：锥体细胞减少，尚清晰，排列较稀疏。复方银杏颗粒低剂量组：锥体细胞数目减少，尚清晰，但不规则，有部分核固缩现象，胞质浓染。都可喜组：锥体细胞较清晰，排列较密，可见少数核固缩。可知复方银杏颗粒对脑缺血造成的海马损害有一定的保护作用，能防止海马细胞变形坏死。 3　讨　论