成熟中国鲎黄色结缔组织中氨基酸含量研究.docVIP

成熟中国鲎黄色结缔组织中氨基酸含量研究摘要：目的测定成熟中国鲎黄色结缔组织中氨基酸的含量。方法用反相液相色谱法。结果鲎黄色结缔组织中氨基酸总含量为79.04 mg/g；各种氨基酸中，含量较高的是谷氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、亮氨酸和甘氨酸，占总含量的63.26%，7种人体必需氨基酸的含量占总含量的43.55％。结论反相液相色谱法可用于测定鲎黄色结缔组织中氨基酸含量。 关键词：成熟中国鲎；黄色结缔组织；氨基酸 中图分类号：Q493.99文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)03-0041-03 Assay of Amino Acids of Yellow Connective Tissue in Mature Horseshoe Crab of China WEI Jing-guang1, 2, DAI Jian-guo1*, JIN Gang1, HUO Guang-hua2 (1. Department of Biological Applied Engineering, Shenzhen Polytechnic College, Shenzhen 518055, China;2. Department of Bioengineering, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045, China) Abstract：Objective To determine the content of amino acids of yellow connective tissue in mature horseshoe crab of China. Methods RP-HPLC was used. Results The total content of amino acids of yellow connective tissue reached up to 79.04 mg/g. The amino acids with high contents were Glu, Ile, Asp, Leu and Gly, which occupied 63.26% of total content. There were 7 essential amino acids with 43.55％of total content. Conclusion The method of RP-HPLC is fit to determine the content of amino acids of yellow connective tissue in mature horseshoe crab of China. Key words：mature horseshoe crab of China; yellow connective tissue; amino acid 黄色结缔组织是鲎体内重要的组织结构，占机体重量的比例大，充满了外壳包被的整个机体，且填充于内脏器官之间。它在鲎的生理活动中起着极为重要的作用。鲎耐饥饿能力很强，春夏季节时，食物充分，可大量进食；秋冬季，鲎往深海迁移，摄食少，甚至长时间不进食。鲎的强耐饥饿能力可能与鲎体内发达的黄色结缔组织储存大量的营养物质有关[1, 2]。目前有关鲎的研究多集中在血液学方面，对其体内黄色结缔组织的研究报道较少。实验分析了成熟中国鲎黄色结缔组织的氨基酸含量，以期为进一步开发利用中国鲎提供实验依据。 1 材料与方法 1.1材料 黄色结缔组织取自成熟的中国鲎。 1.2仪器 Agilent 1100 高效液相色谱仪，四元梯度泵，二极管阵列检测器（DAD），自动进样器，HP-A.09.01 化学工作站（Agilent，美国）；酸度计（ORION，美国）。 1.3试剂 氨基酸的标准品和混合品，衍生剂邻苯二甲醛（OPA）（Agilent）；正缬氨酸（ISTD），氯甲酸芴甲酯（FMOC-Cl）（Sigma）；甲醇，乙腈（色谱纯，天津协和公司）；三乙醇胺，四氢呋喃，乙酸钠（分析纯，广州化学试剂厂）。 1.4方法 1.4.1样品前处理取成熟中国鲎的黄色结缔组织，匀浆，冻干，干燥保存，备用。 1.4.2试剂配制[3]流动相A：0.02 mol/L醋酸钠溶液1 000 mL，加三乙醇胺180 μL，用1％~2％醋酸调pH至7.20±0.05，加四氢呋喃3 mL，0.45 mm滤膜过滤后，超声处理10 min。 流动相B：0.02 mol/L醋酸钠溶液（pH7.20±0.05）-乙腈-甲醇（1:2:2），0.45μm滤膜过滤后，超声处理10 m