人结肠癌CW2干细胞获取方法研究.PDF

第３２卷 第２期 世界科技研究与发展 Ｖｏｌ．３２ Ｎｏ．２ 　 　 ２０１０年４月 ２３５－２３８页 ＷＯＲＬＤＳＣＩＴＥＣＨＲ＆Ｄ Ａｐｒ．２０１０ ｐｐ．２３５－２３８ 人结肠癌 ＣＷ２干细胞获取方法研究 刘　美　陈　宓　艾　亮　龙　浩　李少林 （重庆医科大学放射医学教研室，重庆４０００１６） 摘　要：目的运用３种不同的方法分离纯化人结肠癌ＣＷ２干细胞，并对其分离纯化效率进行比较，探讨获得癌干细胞的有效方 法。方法 采用单纯无血清悬浮培养、无血清悬浮培养联合化疗药物、流式细胞分选技术分别富集人结肠癌细胞株 ＣＷ２干细胞； 然后运用流式细胞术、ＮＯＤＳＣＩＤ小鼠致瘤实验和Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ侵袭实验分析比较３种方法的富集效率。结果 无血清悬浮培养细胞， ＋ ＋ 无血清悬浮培养联合化疗药物处理细胞和流式细胞仪分选技术分选后细胞中具有结肠癌干细胞特性的ＣＤ４４ ＥＰＣＡＭ 细胞分 别为（５９．３９±４．５５）％、（７４．３６±６．７８）％、（８６．４３±８．４３）％；３群细胞的成瘤能力和侵袭能力都存在显著统计学差异（Ｐ值 ＜ ００５）：流式细胞分选技术分选后细胞＞无血清悬浮培养联合化疗药物处理细胞＞单纯无血清悬浮培养细胞。结论流式细胞分选 技术富集癌干细胞的能力强于单纯无血清悬浮培养和无血清悬浮培养联合化疗药物，无血清悬浮培养联合化疗药物又强于单纯 无血清悬浮培养。 关键词：肿瘤干细胞；结肠癌；流式细胞分选技术；奥沙利铂；无血清悬浮培养 ＋ ＋ ＋ 中图分类号：Ｒ７３５．３５；Ｒ７３３５ １；Ｒ７３３５２　　　文献标识码：Ａ　　　 ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＭｅｔｈｏｄｓｏｆｔｈｅＩｓｏｌａｔｉｏｎＣｏｌｏｎＣａｎｃｅｒＳｔｅｍＣｅｌｌｓｆｒｏｍＨｕｍａｎ ＣｏｌｏｎＣａｎｃｅｒＣｅｌｌＬｉｎｅＣＷ２ ＬＩＵＭｅｉ　ＣＨＥＮＭｉ　ＡＩＬｉａｎｇ　ＬＯＮＧＨａｏ　ＬＩＳｈａｏｌｉｎ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＲａｄｉａｔｉｏｎＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００１６） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＵｓｉｎｇｔｈｒｅｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｗａｙｓｔｏｉｓｏｌａｔｅｃｏｌｏｎｃａｎｃｅｒｓｔｅｍｃｅｌｌｓｆｒｏｍｈｕｍａｎｃｏｌｏｎｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＣＷ２，ｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙａｎｄｆｉｎｄｏｕｔｔｈｅｍｏｓｔｅｆｆｉｃｉｅｎｔｗａｙ．ＭｅｔｈｏｄｓＣＷ２ｓｔｅｍｃｅｌｌｓｗｅｒｅｅｎｒｉｃｈｅｄｗｉｔｈｔｈｒｅｅｍｅｔｈｏｄｓｗｈｉｃｈａｒｅｓｉｍｐｌｅｓｅｒ ｕｍｆｒｅｅｍｅｄｉｕｍ，ｓｅｒｕｍｆｒｅｅｍｅｄｉｕｍｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｗｉｔｈａｎｔｉｃａｎｃｅｒｄｒｕｇｓ，ＦＡＣＳ（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ａｃｔｉｖａｔｅｄｃｅｌｌｓｏｒｔｉｎｇ）ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ；ａｎｄｔｈｅｎ ｃｏｍｐａｒｅｄｔｈｅｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆｔｈｅｔｈｒｅｅｍｅｔｈｏｄｓｗｉｔｈｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ｆｕｍｏｒｉｇｅｒｉｃｉｔｙａｓｓａｙｉｎＮＯＤＳＣＩＤｍｉｃｅａｎｄＴｒａｎｓｗｅｌｌｉｎｒａｓｉｏｒ