分子生物学2009-2010-0染色体与DNA-4半不连续复制.DOC

郜刚分子生物学教案 PAGE  PAGE 11 郜刚分子生物学教案 教学单元教案格式 4 第二章 染色体与DNA 课程教案 授课题目：第2章 染色体与DNA 第2节 染色体包装与半不连续复制教学时数：2授课类型： eq \o\ac(□,√) 理论课 □ 实践课教学目的、要求： 理解：DNA半不连续复制的过程及其意义 深入了解：DNA聚合酶的结构 深入掌握：复制的原理、过程 了解：端粒的复制原理教学重点： 重点阐明：酶学 重点指出：复制的方向问题，是如何解决这个问题的 教学难点： 绝对难点：DNA复制的酶学 相对难点：复制的过程的描述教学方法和手段： 老师讲授为主：讲授 视频演示 PPT演示 讨论。以电脑幻灯片边演示边讲述为主，（白板课件）辅以板书（黑板板书） 学生回答问题为辅：（如时间等条件许可的情况下）注：以下内容按实际需要进行取舍 要求有多媒体，因为信息量大，许多结构图需要媒体放映，效果才好 第四讲 染色体与DNA 课程教案 教学内容及过程旁批教学内容与教学设计：（第一课时） 2.16 DNA复制的基本机理 1、DNA复制的基本机理 DNA由两条螺旋的多核苷酸链组成，两条链的碱基通过A:T和G:C之间的氢键联结在一起。在复制过程中首先两条链间的氢键破裂并使双链解旋和分开，然后以每条链为模板，按碱基互补配对原则(A:T，G:C)，由DNA聚合酶催化合成新的互补链，结果由一条链成为互补的两条链，这样新形成的两个DNA分子与原来的DNA分子的碱基序列完全相同。在此过程中，每个子代DNA的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的。这种复制方式称此过程中，每个子代DNA的一条链来自亲代的DNA，另一条链则是新合成的。这种复制方式称为半保留复制(semi conservation replication) 谱。 2、DNA的复制过程（大肠杆菌为例） 双链的解开 RNA引物的合成 DNA链的延伸 切除RNA引物，填补缺口，连接相邻的DNA片段 3、复制起点 DNA复制在生物细胞中要从DNA分子上特定位置开始。这个特定的位置就称为复制起点(Origin of replication)，用ori表示 复制起点是有特定结构的，不是随机的 既然DNA复制不是随机的从DNA分子上的任何一点起始，而是从特定的区域开始，这说明复制起点有其结构上的特殊性。分子遗传学者们利用分子克隆技术，分离出 大肠杆菌染色体DNA复制起点oriC 它由422bp的DNA片段组成，其核苷酸序列已经搞清。其结构特点该为(1)在oriC区域内有一系列对称排列的反向重复序列，即回文结构(palindrome)，这表明区域与复制酶系统的识别有关(2)在oriC区中还有两个转录启动区(启动子)的核苷酸序列，这暗示了转录可能在大肠杆菌染色体DNA复制起始着重的作用。目前已有许多实验表明转录确实是复制的起始所必需的，但具体的作用机制尚不清楚。 4、复制子 DNA复制从起点开始双向进行直到终点为止，每一个这样的DNA单位称为复制子或复制单元(replicon)。在原核生物中，每个DNA分子上就有一个复制子;而在真核生物中，每个DNA分子有许多个复制子，每个复制子长约50-200kb。因此，真核细胞DNA的复制是由许多个复制子共同完成的。 5、大肠杆菌复制起点引发的DNA复制 6、复制方向和速度 单起点、双向等速 多起点、双向等速 7、DNA复制的特点总结 DNA复制的最主要特点是半保留复制和半不连续复制(Semi-ondisctinuous replication)： DNA 在进行复制的时候一其中的一条链为模板连开始复制，经过一系列酶（DNA聚合酶、解旋酶、链接酶等）的作用复制出新的DNA双螺旋。 子代DNA 其中的一条链是亲代DNA 保留下来的也就是说新合成的DNA 中一条链是新合成的另一条是亲代DNA留下来的。成为半保留复制。 在复制起点两条链解开形成复制泡(replication bubbles)，DNA向两侧复制形成两个复制叉(replication forks)。以复制叉移动的方向为基准，一条模板链是3→5，以此为模板而进行的新生DNA链的合成沿5→3方向连续进行，这条链称为前导链(leading strand)。另一条模板链的方向为5→3，以此为模板的DNA合成也是沿5→3方向进行，但与复制叉前进的方向相反，而且是分段，不连续合成的，这条链称为滞后链(lagging strand)，合成的片段即为冈崎片段。这些冈崎片段以后由DNA连接酶连成完整的DNA链。这种前导链的连续复制和滞后链的不连续复制在生物是普遍存在的，称为DNA合成的