Nucleostemin特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖能力的影响.PDF

维普资讯 {【|围病理生 杂志 ChineseJournalofPathophysiolo !!!!! 二 堑 · l33l · [文章编号] 1000—4718(2005)07—1331—05 Nucleostemin特异性 RNA干扰对 HeLa细胞体 内外增殖能力的影响 蔡子微 ， 刘思金 ， 孙丽秋 ， 劳为德 ( 丹 医学院病理生理学教研事，黑龙汀 牡丹汀 157011； 中国科学院遗传与发育生物学研究所转 基因与基因调控研究室，北京 100080；牡丹江市肿瘤医院，黑龙江 牡丹江 157011) [摘 要] 目的：检测肿瘤细胞Nucleostemin(NS)的表达，研究Ns特异性 RNA干扰对 HeLa细胞体内外增殖的 影响。方法 ：提取6种肿瘤细胞总 RNA，厢 RT—PCR和Noahemblot方法检测 Ns的表达。用 NS特异性 siRNA表达 载体转染 Hela细胞，观察转染的HeLa细胞(简称 NS—siRNA—HeLa细胞)体内外增殖的变化。结果：6种肿瘤细胞 中Ns明显高表达。体外培养的NS—silLNA—HeLa细胞中Ns表达显著低于对照组， ／G1期细胞百分率显著升高。 体内致瘤实验显爪，NS—siRNA—HeLa细胞在裸鼠体内增殖显著低于对照组。结论：Ns在肿瘤细胞中高表达具有普 遍性。Ns特异性 RNA干扰使 HeLa细胞进入 S期受阻，并可明显降低 HeLa细胞体内外的增殖能力。 [关键词] Nucleostemin；干细胞；HeLa细胞；细胞周期 [中图分类号] R363 [文献标识码] A NucleosteminspecificRNAiinfluencescellproliferationinHeLacellsinvitro and invivo CAIZi—wei，‘LIUSi—jin，SUNLi—qiu，LAOWei—de2 (DepartmentofP,ahophysiology，Mnd,mjia~MedicalCollege， ，扣昭 15701l，China； lrh~tituteofC,eneticsand Ic!— mentalBiolog)，ChineseAcademyofSciences，＆ 昭 100080，China ；MvAanji,~ TwnorHospital，M 耐 15701l，China) lABSTRACT] AIM ：ToexamineNucleostenfin(NS)expressionintumorcells，andobservetheeffectofNSspecificRNA interferenceonthecellproliferationinHelacells．METHODS：TntillRNAwasextractedfrom 6kindsofculturedtmu orlines．the NSexpressionlevelwasmeasuredbyRT—PCR andNoahem hlot．AnNS—specificsiRNA expressionvectorwasconstructedto transfeetHeLacell(NS—siRNA—HeLa)，andtheproliferationofthecellWasok~rved．RESULTS：NSWashighlyexpressedin 6kindsoftmu orcells．NSexpressionlevelintheNS—siRNA—HeLacellswasremarkablyreduced，andthepercentageofGo／Gl cellsincreased．TheneoplasmformingabilityinnudemicebytheNS—siRNA—HeLacellswasdecreased．CONCLUSION ：NSis hig}Ilyexpressedamongtmu orcells．NS—s