博尔纳病病毒对人少突胶质细胞增殖与凋亡的影响.PDF

第３４卷第５期 第　三　军　医　大　学　学　报 Ｖｏｌ．３４，Ｎｏ．５ ２０１２年３月１５日　　　　　　　　　　 Ｊ　Ｔｈｉｒｄ　Ｍｉｌ　Ｍｅｄ　Ｕｎｉｖ 　　　　　　　　　　Ｍａｒ．１５　２０１２ ４０１ 文章编号：１０００５４０４（２０１２）０５０４０１０５ 论著 博尔纳病病毒对人少突胶质细胞增殖与凋亡的影响 １，２ ２ １，２ １，２ ２ １，２ ２ １，２ 邓　婧 ，李　丹 ，张　亮 ，黄荣忠 ，李文娟 ，马丽华 ，房　亮 ，谢　鹏 　　（４０００１６重庆，重庆医科大学： １ ２ 附属第一医院神经内科 ；神经科学研究中心，重庆市神经生物学重点实验室 ） 　　［摘要］　目的　探讨博尔纳病病毒（Ｂｏｒｎａｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ，ＢＤＶ）感染对人少突胶质细胞（ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅｓ，ＯＬ）增殖与 凋亡的影响。方法　 用ＢＤＶ感染ＯＬ细胞，免疫荧光检测ＯＬ细胞中博尔纳病病毒Ｐ４０蛋白的表达，ＣＣＫ８测定法观察细 胞的生长增殖情况，用流式细胞技术检测细胞的凋亡情况和周期变化，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测凋亡指标 Ｂａｘ、Ｂｃｌ２的相对表达 量。结果　与阴性对照组细胞比较，感染组在博尔纳病病毒感染少突胶质细胞第３天时，免疫荧光能够检测到Ｐ４０蛋白 的表达。随着感染时间的增加，ＢＤＶ感染的ＯＬ细胞增殖能力下降（Ｐ＜０．０５），且通过流式细胞仪检测到病毒感染３ｄ后， 细胞出现凋亡增多。流式细胞仪检测结果显示，与对照组比较，感染细胞周期 Ｇ期延迟（Ｐ＜０．０５），细胞增殖指数降低 ２ （Ｐ＜００５）。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测结果显示，与对照组比较，感染细胞促凋亡蛋白Ｂａｘ表达量增加（Ｐ＜０．０５），抑凋亡蛋白 Ｂｃｌ２表达量下降（Ｐ＜００５）。结论　 ＢＤＶ感染可以抑制ＯＬ细胞增殖，并能通过上调Ｂａｘ蛋白及下调Ｂｃｌ２蛋白表达量， 诱导细胞凋亡的发生。 　　［关键词］　 博尔纳病病毒；少突胶质细胞；细胞增殖；细胞凋亡 　　［中图法分类号］　Ｒ３２９．２８；Ｒ３３８．１；Ｒ３７３　　 ［文献标志码］　Ａ Ｂｏｒｎａｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓｉｎｈｉｂｉｔｓｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｈｕｍａｎｏｌｉｇｏｄｅｎ ｄｒｏｃｙｔｅｉｎｖｉｔｒｏ １，２ １，２ １，２ １，２ ２ １，２ ２ １，２ ＤｅｎｇＪｉｎｇ ，ＬｉＤａｎ ，ＺｈａｎｇＬｉａｎｇ ，ＨｕａｎｇＲｏｎｇｚｈｏｎｇ ，ＬｉＷｅｎｊｕａｎ，ＭａＬｉｈｕａ ，ＦａｎｇＬｉａｎｇ，ＸｉｅＰｅｎｇ １ ２ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｌｏｇｙ，ＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ； ＣｅｎｔｅｒｏｆＮｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＮｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，４０００１６，Ｃｈｉｎａ） 　　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　 ＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＢｏｒｎａｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ（ＢＤＶ）ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａ ｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｈｕｍａｎｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅｓ（ＯＬｃｅｌｌｓ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ　 ＢＤＶｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｆＯＬｃｅｌｌｓｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙＰ４０ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ，ｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙＣ