牛血清白蛋白的研究.PDFVIP

维普资讯 Vo1．29 高 等 学 校 化 学 学报 No．4 2008年4月 CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES 726～730 3-氨基苯硼酸为功能单体在壳聚糖上印迹 牛血清 白蛋 白的研究 王华芳 ，何运华 ，何锡文 ，李文友 ，陈朗星 ，张玉奎 ， (1．南开大学化学系 ，天津 300071；2．中国科学院大连化学物理研究所，大连 116011) 摘要 以壳聚糖为载体 ，3一氨基苯硼酸为功能单体对牛血清白蛋白进行 了分子印迹的研究，并对吸附过程进 行Langmuir等温吸附模型的数据处理．结果表明，印迹聚合物上形成了对于模板分子有较高的吸附容量和 选择性的识别位点，Langmuir等温吸附平衡常数为49．5mL／mg，结合位点的最大表观结合量为 16．3mg／g， 证明了该印迹聚合物对于牛血红蛋白和溶菌酶这些非模板蛋白的吸附不具有选择性． 关键词 3一氨基苯硼酸；牛血清 白蛋白；壳聚糖 ；分子印迹技术 中图分类号 0657．3 文献标识码 A 文章编号 0251-0790(2008)04-0726-05 甲壳素 (Chitin)经脱乙酰基处理后得到壳聚糖 (Chitosan，CTS)，CTS是一种天然聚阳离子碱性多 糖，其基本组成单位为D一葡胺糖．壳聚糖上含有大量羟基和氨基 ，对许多物质都具有离子交换、螯合 和吸附等作用，但是壳聚糖本身与物质的这种结合是没有方向性的，因而未改性的壳聚糖并不具备反 应的选择性．分子印迹技术作为一种具有构效预定性、特异识别性及广泛实用性的技术已得到了普遍 应用．近年来，随着蛋 白质组学研究的开展，开拓一种新型的分离技术手段，已经成为决定蛋 白质组 学能否快速发展的关键性问题之一．应用分子印迹技术 ，对复杂体系中的目标物大分子进行分离富集 的研究正在成为关注的热点，主要集中在分离 (如色谱固定相_1)和检测 (如压电传感器 )两个方面． 然而传统的分子印迹聚合物多是在有机相中合成，故大多数方法不适用于合成以生物大分子为模板分 子的聚合物，因此研制新型的、可以在水溶液中制备以蛋白质为模板的分子印迹聚合物势在必行．壳 聚糖载体和蛋 白质体系有着天然的相容性，并且壳聚糖本身有较大的吸附容量，因此，可将壳聚糖或 改性后的壳聚糖作为印迹聚合物的载体，应用于印迹蛋 白质分子的研究．另外，若能将壳聚糖与分子 印迹技术相结合，将无序的作用力转变为利用特定功能基团进行有序识别的结合位点，则可以提高其 吸附的选择性． 以壳聚糖作为分子印迹的载体已有一些研究报道，主要集中在对于金属离子 J、小分子有机 物 ¨ “]、手性氨基酸_】以及蛋 白质 ¨，” 体系的选择性分离上． 3．氨基苯硼酸(APBA)曾作为亲和色谱填料的接枝化合物已被应用．近年来发现 ，APBA可作为一 种新型的水溶性功能单体，用于合成以蛋白质为模板分子的印迹聚合物 ． 本文采用该新型的功能单体 3一氨基苯硼酸，以一定形态的壳聚糖作为载体，合成了牛血清 白蛋 白 的分子印迹聚合物，结果表明，该印迹聚合物对于牛血清白蛋白具有 良好的选择识别能力． 1 实验部分 1．1 试剂与仪器 壳聚糖 (CTS，浙江金壳生物化学有限公司)，脱乙酰度80％，分子量300000；戊二醛 (天津市光复 收稿 日期：2007-06-27． 基金项 目：国家 “九七三”计划 (批准号：2007CB914101)、国家 自然科学基金 (批准号和天津市 自然科学基金(批准号 06YFJMJC02800，07JCYJC00500)资助． 联系人简介：何锡文，男，教授，博士生导师，主要从事分子光谱及分子识别研究．E—mail：xiwenhe@nankai．edu．cn 张玉奎，男，研究员，博士生导师，中国科学院院士，从事色谱基础理论及新技术开发应用研究．E—mail：ykzhang@dicp．ac．c／1