一种新型hPTH（1-34）基因相关肽的制备及其应用的初步研究.pdfVIP

在高式，雪，零粮(医学版) 2008 ,Jan;27(1) :31-36 J Southeast Univ ( Med Sci Edi ) • 31 • 一种新型 h肝H( 1-34) 基因相关肤的 制备及其应用的初步研究 施小明1 ，王春晓1 气庄志华1 ，吴洁1 ，李泰明1 ，曹荣月 1 ，刘景晶1 (1.中国药科大学生命科学与技术学院微基因药学实验室，江苏南京 21αX9; 2. 上海水产大学食品学院海洋生物制药学科点，上海 2α泊90) [摘要]目的:对hPfH(1 -34 )进行结构改造，提高蛋白水解酶的稳定性，增强酶活性，使之更适合制成滴鼻剂，并验证治疗骨质 疏松症的效果。方法:确定将 h凹咀(1-34) 改造成为防咽-Pro-[ Arg ] hJYlH ( 1-34 ) -Pro-Pro后，构建表达质拉 pED-4PhJYlH ( 1- 34) ，转化 E. coli BUl ( DE3 ) LysE ，乳糖诱导表达，经分离纯化获得目的多肤。将目的多肤与二甲基-β，环糊精、聚丙烯酸、EDTA 制成滴鼻剂，治疗卵巢摘除大鼠(OVXed Rats) 的骨质疏松症。结果:获得纯度较高的Pro-Pro-[ Arg ] h凹H( 1-34)-Pro-Pro ，将 制成的滴鼻剂用于卵巢摘自告大鼠，与生理盐水滴鼻治疗纽相比能显著增加大鼠椎骨骨密度(P 0. 01) 及股骨头骨小梁厚度 (PO. ∞1) ，对鼻和膜没有损伤。结论:Pro-Pro-[ Arg ] hPTH( 1-34)-Pro-Pro 制成滴鼻剂治疗卵巢摘除大鼠的骨质疏松症效果 明显，有进一步开发的前景。 [关键词]人甲状旁腺素;滴鼻剂;骨质疏松症:骨密度;骨小梁 [中图分类号] R587.02 [文献标识码] A [文章编号] 1671-6264(2 ，8 )01-∞31-06 ∞ 骨质疏松症是一种老年人和绝经后妇女的常见疾 1 材料与方法 病，容易造成骨折，降低生活自理能力。甲状旁腺素 1. 1 材料 (PTH) 是一种由甲状旁腺分泌的激素，由 84 个氨基酸 组成，是血钙的主要调节剂之一[1] 。凹E 小剂量多次 pET28ansB-C 为本实验室构建保存，pET部a 购自 TaKaRa公司，大肠杆菌 Bl21 (DE3) 为本实验室保存， 给药具有明显的成骨作用，PTH (1 -34 )则完全保留了 CM52 购自Whatman 公司，二甲基-ß-环糊精( DM-ß- 这种活性，所以 PTH(1 -34) 成为目前治疗骨质疏松的 理想药物以.2] 0 PTH 及其相关肤类药物都采用注射给 CD) 购自 Sigma 公司，SD 大鼠由中国药科大学动物实 验中心提供，其他试剂均为进口分装或国产分析纯。 药，频繁给药给患者带来极大的不便和痛苦。与注射 1. 2 方法 剂相比滴鼻剂具有使用方便、患者依从性较好等特点， 1.2. 1 Pro-Pro-[ Arg l1 ] hPTH ( 1-34) -Pro-Pro表达和纯 因此开发 PTH(1 -34) 的滴鼻剂具有广阔的市场前景。