NGSquantTMLibraryqPCRKitforIllumina说明书-复能基因.PDF

NGSquant™ Library qPCR Kit for Illumina® Catalog# QP100 说明书 广州易锦生物技术有限公司 Guangzhou iGene Biotechnology Co., Ltd. 地址：广州科学城掬泉路3号F区F801 （510663 ） Address : F801, Building F, #3, Juquan road, Science park, Guangzhou （510663 ） 电话(Tel)：(020)28069233 订购电话(To order)：4006-020-200 网站： © 2016 GeneCopoeia, Inc. 说明书 NGSquant ™ Library qPCR Kit for Illumina® I. 产品说明3 II. 试剂盒内容4 III. 产品应用4 IV. 注意事项5 V. 操作流程 6 5.1 文库稀释6 5.2 qPCR 反应设立7 5.3 qPCR 反应程序9 VI. 数据分析9 VII. 有限使用许可及质保声明12 2 NGSquant ™ Library qPCR Kit for Illumina® I. 产品说明 NGSquantTM Library qPCR kit for Illumina提供一整套试剂，用于对片段两端分别连接 Illumina P5 和 P7 芯片序列的文库样品进行 DNA 分子数定量。试剂盒包含以下四种组分： ① 文库 DNA定量 标准品 （qPCR DNA standard for Illumina ）：经过梯度稀释的六份 460bp 双链 DNA 片段溶液 （20pM-0.0002pM），经过绝对定量和严格质控，用于标准曲线制作； 编号 浓度 质量浓度 每1ul中DNA拷贝数 DNA标准品 （1） 20pM 5.7pg/μL 1.2×107 DNA标准品 （2 ） 2 pM 0.57pg/μL 1.2×106 DNA标准品 （3 ） 0.2 pM 0.057pg/μL 1.2×105 DNA标准品 （4 ） 0.02 pM 0.0057pg/μL 1.2×104 DNA标准品 （5 ） 0.002 pM 0.00057pg/μL 1.2×103 DNA标准品 （6 ） 0.0002 pM 0.000057pg/μL 1.2×102 ② 文库定量引物 （qPCR primer Mix for Illumina ）：含有 Illumina P5，P7 芯片序列并经过优化设 计的一对 qPCR 引物； ③ 2 ×qPCR 预混液 （2 ×All-in-One qPCR Mix ）：含有热启动 DNA 聚合酶和 qPCR 反应所需成 分； ④ ROX ：参比染料。 NGSquantTM Library qPCR kit for Illumina 使用 2 ×All-in-One qPCR Mix 和基于 Illumina P5 、P7 芯片序列设计的文库定量引物对一系列梯度稀释的 DNA 标准品和适当稀释的文库样品进行qPCR扩 增，然后以每个 DNA 标准品的浓度 （以 pM 为单位）的对数值为横坐标，平均 Ct