不同培养条件对拟南芥根细胞膜片钳记录的影响.pdfVIP

植物学通报 2005, 22 (1): 27~31 Chinese Bulletin of Botany 研究论文 不同培养条件对拟南芥根细胞膜片 钳记录的影响① 张国增 安国勇 宋纯鹏② (河南大学生命科学学院植物逆境生物学实验室 开封 475001) 摘要 本文以沙培养法、蛭石培养法、土培养法、水培养法和MS 培养基等不同的方法培养拟南芥 (Arabidopsis thaliana ) ，分析了不同培养方法对根生长发育的影响，并分别分离根的原生质体。在膜片 钳记录中对不同来源的根原生质体状态进行了比较。结果表明，土培养法分离的原生质体最适于膜片钳 记录。 关键词 拟南芥，培养方法，原生质体，膜片钳 Patch Clamp Recording of Arabidopsis Root Cells Under Different Cultural Conditions ZHANG Guo-Zeng AN Guo-Yong SONG Chun-Peng② (Laboratory of Plant Stress Biology , College of Life Science, Henan University , Kaifeng 475001) Abstract We analyzed the effects of different cultural conditions — sand, vermiculite, nutritive soil, water and Murashige-Skoog medium — on the development of root protoplasts isolated from Arabidopsis thaliana . Patch clamp recording revealed that the quality of root protoplasts was supe- rior with nutritive soil culture. Key words Arabidopsis thaliana , Culture methods, Protoplast, Patch clamp 植物体内所需要的无机营养物质大部分是 (Schachtman and Schroeder, 1994；Roberts and 由根从土壤中获取的。营养物质跨膜运输过 Tester, 1995)和通过钠离子的通道(Maathuis and 程中，膜中的离子通道起了重要作用 Sanders, 2001; Demidchik and Tester, 2002)。由 (Maathuis et al., 1997) 。在营养吸收和盐胁迫 于拟南芥(Arabidopsis thaliana )遗传背景简单 机制的研究中，通过膜片钳(patch clamp)技术 并具多种类型的突变体，为这方面研究提供 研究质膜上通道特性的变化可以得到许多有价 了丰富的遗传材料。尽管也有文献报道用拟 值的信息。目前利用膜片钳技术已从根细胞 南芥根分离原生质体 (Maathuis and Sanders, 中发现多种吸收营养物质的通道蛋白 1995; Demidchik and Tester, 2002)，但在膜片 ①国家重点基础研究发展规划项目(2003CB114305) 、国家自然科学基金和河南省自然科学基金 (111010500) 资助。 ②通讯作者。Author for correspondence. E-mail: Songcp@henu.edu.cn 收稿日期：2004-06-08 接受日期：2004-10-18 责任编辑：崔郁英, 白羽红 28 22(1) 钳记录中，特别是进行药理学分析而加入试 强度120 µmol m-2 s-1 。 · · 剂处理时，存在封接成功率低、记录时间短 1.4 试验溶液 和封接不稳等问题。本文从培养条件及酶解