Ⅰ型内含子核酶研究进展.pdf

维普资讯 2003；30 (3) 生物化学与生物物理进展 Pr0g．Biochem．Biophys． ·363 · I型 内含子核酶研究进展* 李志杰 张 翼 (武汉大学生命科学学院，武汉 430072) 摘要 I型内含子核酶作为最早被发现的RNA催化剂，在过去 2(】年里得到了深入研究．相关研究成果使人们 在RNA的生物学功能、催化特征、结构与折叠特征等方面的认识有了革命性更新．回顾 了I型内含子核酶研究 的主要进展 ，重点对近年来在 I型内含子核酶的结构和折叠方面所取得的重要成果进行了介绍，分析和总结． 关键词 I型内含子 ，核酶，催化 ，结构，折叠 学科分类号 Q71 在 I型内含子核酶被发现之前，蛋白质一直被 中需要 镁离 子、外源鸟苷 或 其磷 酸 化衍 生 物 认为是唯一具有催化功能的生物大分子 ．1982年， (GIv口P、GDP、GTP)．首先，一个外源鸟苷的 3 Kruger等_1J报道 了在没有蛋 白质存在 的条件下， 羟基攻击 5剪接位点 的磷原子，并与 内含子 5的 四膜虫 (Tetrahymenathermophilia)26SrRNA 第一个核苷酸形成 3，5磷酸二酯键 ；然后，5外 的前体可以在体外 自我剪接 (autoexcision或 self— 显子的3羟基攻击 3剪接位点的磷原子，导致 内 splicing)，它所含 的I型 内含子 RNA可 以催化核 含子的释放和外显子的连接 (图 1)．这个反应机 酸主链上的磷酸二酯键断裂和连接反应 ．在随后的 制是由体外剪接研究得到的，实验证明此反应中间 几年中，更多的实验事实证明四膜虫 I型内含子具 产物在体 内也存在，表明I型内含子在体内的剪接 有和蛋 白质酶相似 的催化能力_2J．几类其他的 是通过同样 的反应机制．剪接反应释放出5端连 RNA也相继被证 明具有催化活性．为了与蛋 白质 有外源 G的内含子是 I型 内含子 自剪接反应的显 酶类相区别，化学本质为 RNA的具有催化功能的 著特征[61． 生物大分子被统称为核酶 (ribozyme)． 除了I型 内含子核酶之外，过去十几年里陆续 发现的核酶主要包括 ：锤头状核酶 (hammerhead ribozyme)，发卡状核酶 (hairpinribozyme)，HDV 核酶 (hepatitisdeltavirusribozyme)，Neurospora 卓 varkudsatellite核酶，RNaseP核酶，以及 Ⅱ型 内 含子核酶等 3【1． 近两年来 ，人们又发现两种重要的有催化活性 的RNA：一种是真核生物剪接体所包含的U2和 U6RNA_4J ， 另一种是核糖体大亚基 rRNA[5J．核 糖体大亚基rRNA是 目前发现最大的核酶，它所具 有的肽键转移酶活性在 已经发现的各种核酶中也显 5 3 得很特殊，因为无论其他核酶所催化的反应有多复 杂，其本质都是磷酸酯键转移反应．另外，人们通 Hg．1 Self-splicingmechanism ofgroup I introns[6] 过体外演化 (invitroevolution)的方法得到了一 图1 I型内含子的自剪接反应[6] 些可以催化其他生化反应的人工核酶． 圆圈 …O’所在处为剪接位点． 1 I型内含子核酶的体外催化 国家 自然科学基金资助项 目 ． 1．1 天然 I型 内含子核酶所催化 的反应 通讯联系人．武汉大学生命科学学院生物技术系 I型内含子核酶所催化的典型反应是包括两