阿片肽酿酒酵母工程菌摇瓶发酵工艺 - 江南大学杂志社.pdfVIP

第 24 卷第 5 期 食 品 与 生 物 技 术 学 报 Vol . 24 　No . 5 　 　 　 　　　　 　 2005 年 9 月 Journal of Food Science and Biotechnology 　 　 　　　　 Sep . 　2005 文章编号 (2005) 　 阿片肽酿酒酵母工程菌摇瓶发酵工艺 1 2 2 陈义勇 , 　施用晖 , 　乐国伟 ( 1. 常熟理工学院 生物科学与工程系 , 江苏 常熟 2 15500 ; 2 . 江南大学 食 品学院 , 江苏 无锡 2 14036) 摘 　要 : 研究了发酵培养基成分 、补加方式及外源氨基酸对酿酒酵母发酵和表达的影响. 结果表 ( ) 明 ,发酵前在液体发酵培养基中一次性补加酵母抽提物 YE 有利于 目的产物的表达 ,发酵过程中 补加 YE 不利于目的产物的表达 ,发酵中后期补加适量的葡萄糖有利于阿片肽的表达. 添加外源 氨基酸对酿酒酵母工程菌的生长有一定的促进作用 ,而且可以明显地影响阿片肽的表达. 通过正 交实验对酿酒酵母生长和表达条件进行优化 ,确定最优工艺参数为 :培养基中酵母抽提物质量浓 度为 25 g/ L ,C ∶N 比2 . 8 ,培养基初始p H 5 . 0 ,摇床转速 220 r/ min . 在最优条件下研究了酿酒酵 母表达 目的产物的情况 ,总蛋白质质量浓度为 6 14 . 50 mg/ L . SD SPA GE 电泳和双波长凝胶扫描 结果表明: 目的阿片肽约占总分泌蛋白质的 5 % ,其表达量为 30 . 7 mg/ L ,是优化前的 1. 49 倍. 关键词 : 阿片肽 ;酿酒酵母 ;发酵 中图分类号 : TQ 920 文献标识码 : A Expressing Foreign Opium Peptide by Fermentation of Recombinant S acch a r omyces cer evisi ae in Shake Flask C H EN Yiyong1 , 　SH I Yon ghui2 , 　L E Guowei2 ( 1. Dep art ment of Biological Science and Engineering , Changshu In stit ut e of Technolo gy , Changshu 2 15500 , Chi na ; 2 . School of Foo d Science and Technolo gy , Sout hern Yangze U niver sit y , Wuxi 2 14036 , China) Abstract :The eff ect s of medium an