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鸡场抗体水平检测与解读
鸡场抗体检测与解读 PVM动保中心--出栏肉鸡抗体检测周报 (第47周 11月16日--11月22日) 公司 序号 客户 日龄 项目 HI ELISA 免疫计划 -4 -5 H9 ND IBV IBD REO 天津 1 陈久长 41ds MAX 3 0 1 10 4699 4553 4556 1日龄 公司首免 MIX 1 0 0 2 388 1168 878 9日龄 新支妥 瑞普 点眼 GMT 1.8 1.0 1.0 4.3 1579.1767 2296.2 1919.2557 CV% 27 0 212 45 71.416545 41 51.549656 2 李家来 42ds MAX 2 0 1 9 2291 2567 2822 1日 公司首免 MIX 0 0 0 4 164 1432 237 7日龄 新支妥 瑞普 点眼 GMT 1.4 1.0 1.0 5.9 1070.5 1851.2 1152.4 21日龄 新威灵 梅里亚 饮水 CV% 100 0 173 27 53 22 52 3 刘广利 43ds MAX 3 0 6 7 1657 5698 2746 1日龄 公司首免 MIX 1 0 1 2 233 1404 72 9日龄 新支妥 瑞普 点眼 GMT 1.3 1.0 1.7 3.6 512.1 3131.6 532.0 CV% 58 0 91 42 69 37 101 抗体检测周报 血凝(HA)和血凝(HI)抑制试验-以新城疫为例 血凝试验(HA),目的:滴定病毒的血凝效价;原理:某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某种动物的红细胞发生凝集,这种凝集红细胞的现象称为血凝(HA),也称直接血凝反应。 病毒颗粒 红细胞 血凝效价测定步骤 ? 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 2× 4× 8× 16× 32× 64× 128× 256× 512× 1024× 2048× 红细胞对照 生理 盐水 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 抗原 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 弃50 红细胞 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 结果 ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ + ++ + - - - - 1.在血凝板上第一排的1-12孔内各加入50ul生理盐水 2. 在第1孔内加入50ul病毒抗原,然后依次倍比稀释至第11孔,最后弃50ul。 3.每孔加入1%鸡红细胞悬液50ul 4.轻轻振荡均匀,后放于室温或37℃中静置30分钟 5.结果判定 结果判定标准: 1、++++:红细胞呈细沙样均匀铺于孔底,即100%凝集; 2、+++:红细胞均匀铺于孔底,当边缘不整齐而稍向孔底集中,即75%凝集; 3、++ :红细胞形成一个环状,四周有凝集块,即50%凝集; 4、+ :红细胞于孔底形成圆团,边缘不够光滑,四周稍有凝集块,即25%凝集; 5、- :红细胞于孔底形成圆团,边缘光滑整齐,即无凝集。 以100% 凝集的病毒最大稀释度为该病毒的血凝价,即为一个凝集单位。上表看出,该新城疫病毒液的血凝价为1:32,则l:32为1个血凝单位,1:16、l:8分别为2、4个血凝单位,或将32/4=8,即1:8稀释的病毒液为4个血凝单位。 根据判定结果,吸取1毫升已稀释的病原溶液再以8倍稀释,即为4个血凝单位的标准抗原,以备凝血抑制试验使用。 ++++ +++ ++ + - 血凝试验(HA)结果判定 血凝抑制试验(HI),目的,确定抗体水平;原理:当在病毒的悬液中加入特异性抗体,且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时,则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或血凝素直接接触。这时红细胞的凝集现象就被抑制,称为红细胞凝集抑制(HI)反应,也称血凝抑制反应。 I am late! 抗体 抗原 1、在血凝板上1-12孔内各加入50ul生理盐水; 2、在第1孔内加入被检血清50ul,然后倍比稀释至第11孔,最后弃50ul; 3、第1-12孔内加入4个单位血凝抗原50ul(第12孔为病毒对照); 4、每孔加入1%鸡红细胞悬液50ul; 5、轻轻振荡均匀,后放于室温或37℃中静置30分钟 6、结果判定 血凝抑制试验步骤 ? 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 2
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