Akt与βTC-6细胞生存及功能间关系的实验研究.pdf

Y769903 复旦人学 博士研究生论文 论文题目： Akt与B TC-6细胞生存和功能间关系的实验研究 An of betweenAktand experimental the studyrelationship survivaland functionofB‘rc_6cell 系(部)： 中【fI医院 学科、专业： 外科学 研究生： 阳峻 导 师： 秦新裕教授 导师组成员： 牛伟新教授 孙益红教授 宋陆军副教授 ／tkt与BTc-6细胞生存和功能问关系的实验研究 中文摘要 关键词：Akt；eTC一6细胞；糖尿病 糖尿病是严重影响人类健康的疾病，在世界范围内其发病率正逐渐增高。近 20年来我国糖尿病的发病率亦呈逐渐上升的趋势，已成为继恶性肿瘤和心脑血 管疾患之后的第三位重要的慢性非传染性疾病。因自身免疫反应所导致的胰岛内 8细胞的损伤破坏和相应的胰岛素供给不足与I型糖尿病的发生相关，而II型 糖尿病则源自于胰岛素抵抗，肝脏葡萄糖产出增加，以及胰岛素的分泌异常等因 素的综合。胰岛素的作用缺陷通常发生在葡萄糖不耐受产生之前，因为胰腺能通 过增加胰岛素的产量和分泌而代偿胰岛素抵抗。这可能是通过增强细胞分泌容量 或增加B细胞群的规模而获得。当B细胞失去代偿，胰岛素的分泌不能与增强 的胰岛素抵抗和葡萄糖不耐受相匹配，最终就将产生明显的高血糖。高血糖能加 剧胰腺B细胞的功能缺陷，已有证据表明升高的血糖浓度在体内外都能引起8 细胞凋亡。因此，抗B细胞损伤和凋亡，促进B细胞的生存并改善其功能可能 kinase 是治疗糖尿病的有效途径。Akt基因，亦即蛋白激酶B(ProteinB，PKB) 基因，其产物是一种丝氨酸／苏氨酸激酶。研究表明，Akt具有促进细胞生存、 抗凋亡、以及调节葡萄糖代谢和蛋白质合成等重要功能，因而成为近年来糖尿病 相关研究中的一个新的靶点。本研究利用源自SV40大T抗原转基因小鼠的胰岛 素瘤的B细胞系B 其与BTC一6细胞功能间的关系，随之通过构成性激活的Aktl基因表达质粒转染 实验来检测活性Aktl蛋白对BTC一6细胞生存和功能的影响，从而为发展相应的 经Akt途径治疗糖尿病策略提供支持。 2 不同Akt基因的表达与13TC-6细胞功能问的关系 目的是探讨在链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)诱导的BTC一6细胞损伤 过程中，Akt基因各异构体(Aktl／Akt2／Akt3)的表达与13TC一6细胞功能间的 关系。应用实时荧光定量RT—PCR技术，检测体外培养条件下STZ诱导的BTC一6 与对照组比较。结果从101MSTZ作用前至作用后24h、72h，13TC一6细胞的Akt 基因表达水平呈下降趋势，其中，每百万看家基因中Aktl基因的拷贝数从 有显著差异(PO．05)。此外，从lO。2M TC一6