温肾益气颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠病理变化影响.doc

温肾益气颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠病理变化影响摘要　目的：观察温肾益气颗粒对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠病理变化的影响。方法：实验分为正常对照组、模型组和温肾益气颗粒高、中、低剂量治疗组，各治疗纽在造模第29天开始至第70天胃饲温肾益气颗粒。取右下叶肺组织行HE染色，Masson三色染色，测量基底膜周长、气道管壁总面积、单位面积平均肺泡数、平均肺泡面积以及气道壁胶原阳性面积等。结果：温肾益气颗粒高、中剂量治疗组能明显减轻炎症细胞浸润，且对小气道的增厚有明显抑制作用，但低剂量治疗组对小气道增厚未见明显抑制作用，炎症细胞浸润亦未见明显减轻。温肾益气颗粒高、中、低剂量治疗组与模型组相比单位面积平均肺泡数明显增加而平均肺泡面积明显减小。温肾益气颗粒高剂量治疗组可明显抑制小气道胶原的增厚，中、低剂量治疗组对支气管胶原的增厚无明显抑制作用。结论：温肾益气颗粒可以减轻COPD大鼠的病理变化。 关键词　慢性阻塞性肺疾病　温肾益气颗粒　大鼠　病理变化 慢性阻塞性肺疾病(COPD)是具有不完全可逆气流受限特征并呈进行性发展的肺部非特异性炎症性疾病。气道重构是COPD主要病理特点之一，在气流受限中扮演非常重要的角色。目前临床上尚未有疗效明确的药物能治疗COPD气道重构。本实验观察温肾益气颗粒对COPD大鼠模型病理变化的影响。 1　材料与方法 1．1　材料：分述如下。 1．1．1　实验动物：SD健康雄性大鼠(清洁级)，体重150±20g，由浙江中医药大学动物实验中心提供。 1．1．2　受试药物：温肾益气颗粒(由黄芪、菟丝子、紫石英等组成)6g／包，由浙江省中医院中药房提供。 1．1．3　对照药物：生理盐水由石家庄四药股份有限公司生产，规格：500ml／瓶。 1．1．4　主要试剂：脂多糖(LPS)购自美国Sigma公司；大前门牌香烟(每支含烟碱量为13mg，尼古丁为1.0mg)为上海卷烟厂制造。 1．1．5　主要仪器与设备：Leica石蜡切片机，德国Leica公司；OLYMPUS BX20型荧光显微镜摄像机，日本OLYMPUS公司；HPIAS一1000病理图文分析系统，中国武汉同济千屏影像工程公司。 1．2　建立COPD模型和药物干预方法：分述如下。 1．2．1　动物分组：将50只大鼠随机分为5组，即正常对照组、模型组、温肾益气颗粒高、中、低剂量治疗组，每组10只。 1．2．2　COPD模型建立：正常对照组每天在自制吸烟染毒箱内以相同时间呼吸正常空气，并于造模第1、28天每只大鼠气道内滴入0.2ml生理盐水。4组COPD模型大鼠在自制吸烟染毒箱内被动吸烟20支，每天2次，每次30分钟，间隔8h，共70天；造模第1、z8天气道内滴入LPS0.2ml(200ug)，该日内不予以吸烟。模型组、温肾益气颗粒高、中、低剂量治疗组在气道内滴入LPS及烟熏时分别死亡2、2、1、2只。 1．2．3　药物治疗：温肾益气颗粒高、中、低剂量治疗组在造模第29天开始至第70天每日胃饲温肾益气颗粒，用量依次分别为2.1g／kg、4.2g／kg、8.4g／kg加生理盐水配制成2ml，相当于临床成人用药量的7、14、28倍。对照组及模型组每日胃饲2ml生理盐水。 1．3　标本处理：实验结束后断颈处死大鼠，取右下叶肺组织用10％甲醛固定，分别作HE染色、Mas―son三色染色。 1．4　病理图像分析：按照文献，将气道分为大气道(Pbm2000um)、中等气道(Pbml000～2000um)、小气道(Pbm％1000gm)。选取小气道作为主要观察目标。HE染色，观察炎症细胞浸润、纤毛上皮、杯状细胞等病理变化，测量基底膜周长(Pbm)、气道管壁总面积(WAt)、单位面积平均肺泡数、平均肺泡面积等。在Masson染色，测量细支气管壁胶原阳性面积(WAc)，细支气管的周长(Pbm)。 2　结果 2．1　大体病理：光镜下模型组可见细支气管纤毛粘连倒伏，部分上皮细胞剥脱、变性坏死，杯状细胞增生，且气管粘膜下层、肌层出现不同程度的淋巴细胞、巨噬细胞等浸润现象；呼吸性细支气管及肺泡管呈囊状扩张，管壁明显增厚，肺泡间隔断裂，肺泡腔明显不规则膨大。而高、中剂量治疗组能在一定程度上抑制肺大泡形成及炎症细胞的浸润。低剂量治疗组与模型组炎症细胞的浸润无明显减轻现象。 2．2　各组大鼠单位面积平均肺泡数和平均肺泡面积比较：详见表1。模型组大鼠单位面积平均肺泡数明显减少，平均肺泡面积显著增大，与正常对照组相比(P均0.05)。 2．3　各组大鼠基底膜单位长度管壁厚度比较：详见表2。模型组大鼠小气道管壁明显增厚，与正常对照组相比(P0.01)。高、中剂量治疗组可以明显抑制小气道管壁的增厚，与模型组相