高中生物-探究导学课型-专题1-基因工程-1.2-基因工程的基本操作程序同课异构课件-新人教版选修3.pptVIP

2.将目的基因导入受体细胞: 分析农杆菌转化法示意图,回答第(1)题。 (1)在用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中,为什么一定要将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上? 提示:Ti质粒上的T-DNA也称为可转移DNA,可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上。 (2)植物基因工程常用的受体细胞为什么可以是体细胞,而动物基因工程一般只用受精卵? 提示:植物体细胞的全能性较高,可经植物组织培养过程形成完整植物体,因此受体细胞可以是体细胞;动物体细胞的全能性受到严格限制,因此动物基因工程中的受体细胞一般只用受精卵。 (3)将目的基因导入微生物细胞时,为什么受体细胞常选择原核生物? 提示:原核生物具有繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等特点。 (4)导入微生物细胞时,常用Ca2+处理的机理是什么? 提示:Ca2+可以改变细胞膜的通透性,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。 【规律方法】选择受体细胞的方法 (1)植物:可以是受精卵(花粉管通道法)或体细胞(可经组织培养成为完整植株)。 (2)动物:受精卵(因为体细胞的全能性难以表达)。 (3)微生物:若要获得基因产物,常把目的基因转入细菌、酵母菌等微生物中。微生物的繁殖速度较快,短时间内可获得大量基因产物。 【归纳总结】基因表达载体的构建过程 将切下的目的基因片段插入质粒的切口处,再加入适量DNA连接酶,形成一个重组DNA分子(重组质粒)。构建过程如下图所示: 【过关小练·即时应用】 1.(2015·邢台高二检测)如图是利用基因工程技术培育转基因植物,生产可食用疫苗的部分过程示意图,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制酶。下列说法错误的是　(　　) A.图示过程是基因工程的核心步骤 B.表达载体构建时需要用到限制酶SmaⅠ C.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来 D.除图示组成外,表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构 【解题指南】解答本题需要注意两个关键点: (1)明确基因表达载体必需的构成。 (2)在保证表达载体必备结构完整的情况下选择目的基因的插入位点,从而选择相应的限制酶。 【解析】选B。图示过程为基因表达载体的构建过程,是基因工程中的核心步骤,A正确。构建过程中需要将目的基因完整切割下来,此时要用到限制酶PstⅠ、EcoRⅠ,B错误。抗卡那霉素基因是标记基因,目的是便于鉴定和筛选含有目的基因的细胞,C正确。基因表达载体包括启动子、目的基因、终止子和标记基因等,D正确。 2.农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,能在自然条件下感染植物,因而在植物基因工程中得到了广泛的应用。下图为农杆菌转化法的示意图,试回答下列问题: (1)一般情况下农杆菌不能感染的植物是　 , 利用农杆菌能在自然条件下感染植物的特点,能实现______________　 　　　　　　　　　　　　　。具体原理是在农杆菌的Ti质粒上存在 T-DNA片段,它具有可转移到受体细胞并整合到受体细胞的_________ 上的特点,因此只要将携带外源基因的DNA片段插入_______________ (部位)即可。 (2)根据T-DNA这一转移特点,猜测该DNA片段上可能含有控制_______　　　　　　　　(酶)合成的基因。 (3)图中c过程中,能促进农杆菌移向植物细胞的物质是　　　类化合物。 (4)植物基因工程中将目的基因导入受体细胞的方法除了农杆菌转化法之外,还可采取　　　　　　　　　　　　　。(至少写出两种) * 1.2　 基因工程的基本操作程序 探究1 目的基因的获取 【研读教材·自主认知】 1.目的基因:主要是指___________的基因,也可以是一些具有_______ ___的因子。 2.目的基因的来源:可以从自然界中已有的_____中分离出来,也可以 用___________合成。 编码蛋白质 调控作 用 物种 人工的方法 3.获取目的基因常用的方法: (1)从_________中获取。 (2)利用PCR技术扩增目的基因。 (3)人工合成法。 基因文库 【小判断】 (1)基因工程的核心步骤是目的基因的获取。　( ) 【分析】基因工程操作的核心是基因表达载体的构建,目的基因的获 取是基因工程操作的第一步。 (2)目的基因可以从自然界已有的物种中分离,也可以用化学方法人工 合成。　( ) 【分析】如果目的基因的序列是已知的,可以采用化学方法合成,如合 成胰岛素基因。 × √ (3)人工合成目的基因不需要用限制性核酸内切酶。　( ) 【分析】人工合成目的基因有两种方法,其一是化学合成法,即用游离的脱氧核苷酸合成,不需要限制性核酸内切酶;其