益气活血方对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管壁影响.docVIP

益气活血方对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管壁影响摘要：目的：观察益气活血方对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管壁的影响。方法：SD大鼠48只，随机分成4组。用2.0F球囊导管自右股动脉插管建立大鼠左颈总动脉球囊损伤模型，治疗结束，麻醉，心脏放血处死大鼠，取损伤大鼠左颈总动脉，常规固定、包埋、切片，做HE染色和Masson染色。用HMIAS－2000型全自动彩色图象分析系统，观察动脉球囊损伤后不同时相点血管壁病理改变，进行比较分析。结论：成功复制球囊损伤术后颈总动脉再狭窄动物模型；益气活血方可显著防止或减轻大鼠颈总动脉球囊扩张后所致的血管狭窄，益气活血方大剂量作用更明显。 关键词：经皮腔内冠状动脉成形术；益气活血；再狭窄；中医药疗法 中图分类号：R－33　文献标识码：A　文章编号：1673－7717(2007)09－1929－03 经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)已成为越来越多冠心病患者广泛的治疗选择。PTCA后3－6个月再狭窄(restenosis，RS)发生率高达32％－57％，阻碍了其在临床上的应用和发展。现代研究表明PTCA后RS是一个多环节，连续的组织反应过程。为了预防和治疗PTCA后RS，人们对其进行了大量的基础和临床研究，但总体效果仍不尽人意。再狭窄的基本病理变化，中医认为本病属于“血瘀症”范畴，基本病机是本虚标实。本虚是以脏气亏虚为主；标实以血瘀多见，故治宜益气活血为主。在中医气血理论指导下，笔者根据RS发病机制遣方用药，选择黄芪、川芎、三七组成益气活血方，观察益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后再狭窄的干预作用，以期为中医药防治再狭窄提供初步的实验依据。 1　材料与方法 1．1　实验动物　清洁级雄性SD大鼠48只，体重350－450g，由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。 1．2　主要仪器和试剂　2.0F Fogarty球囊导管(EdwardsLifesciences公司产品)；SSW－3X显微外科手术器械包：上海医疗器械有限公司手术器械厂(沪药械字2001第2020198号)；德国Leica2135切片机；HMIAS－2000型全自动彩色图象分析系统；戊巴比妥钠：中国医药集团上海化学试剂公司(批号。 1．3　中药制备　益气活血方由(黄芪25g，川芎15g，三七5g)配伍组成。药物制备：三七粉碎过百且筛研成末，川芎采用水蒸汽蒸馏法提取挥发油，提药后药渣和黄芪一起加适量水煎煮2次，药液合并浓缩至一定浓度，加入三七粉、川芎挥发油混匀，高温消毒，分别制成大、小浓度为0.9g／mL和0.45g／mL浓度的汤药。 1．4　动物分组　雄性SD大鼠48只，按体重排序编号，随机数字表法将动物分成4组，每组2个时相点(5天和28天)，每个时相点6只动物。A假手术组：麻醉大鼠及分离左颈总动脉行右侧股动脉分支插管至左颈总动脉同模型组，但不使球囊充盈即撤出导管，余处理亦同模型组；B模型组；C益气活血方小剂量组；D益气活血方大剂量组。 1．5　动物造模　具体方法如下：腹腔注射戊巴比妥钠(40mg／kg)麻醉大鼠，手术中需要时给予10mg／kg补加。祛毛备皮(颈部下正中和右大腿内侧皮肤)，大鼠仰卧固定于手术台上。消毒大鼠颈部皮肤，沿颈正中线切开，暴露左颈总动脉。消毒大鼠右侧腹股沟处皮肤，分离股动脉，选择股动脉分支下约１cm处结扎远心端。用弹簧片手术剪在结扎上方作一适度切口，将2.0F球囊导管插入股动脉，在特定动物体位下(使大鼠颈部向上倾斜约30°角)，将球囊导管沿股动脉插至左侧颈内外动脉分叉处(从颈部暴露切口确认)。球囊充盈生理盐水(约0.2mL)，牵拉导管(移行约1.5cm)，造成颈动脉损伤，回抽生理盐水，使球囊恢复原状，然后再度送人导管。重复上述操作3次。撤出导管，结扎动脉切口近心端，缝合皮肤，术后肌肉注射青霉素20万U／(dkg)3天。 1．6　动物给药　模型组不给药，造模前1天，中药各组根据体表面积换算法，分别按相应的浓度，以0.8mL／(100gd)方案给大鼠灌胃，模型组及假手术组以0.8mL／(100gd)生理盐水灌胃，连续治疗5天或28天。 1．7　取材切片与染色术后第5天和28天，大鼠麻醉(腹腔注射戊巴比妥钠30mg／kg)，心脏放血处死，取左颈总动脉损伤段约1.0cm，4％中性多聚甲醛固定液固定，石蜡包埋，做病理切片，切片厚度约5μm。做HE染色和Masson染色。 1．8　病理学观察指标　将图片输入HMIAS－2000型全自动彩色图象分析系统，观察内皮剥脱后5天、28天血管的炎性反应、血栓形成、内膜增生以及VSMC增殖反应和细胞外基质生成情况。 1．9　统计方法　数据统计采用SPSS12.0软件包，各组数据用x±s表示，各组均值