睾丸支持细胞介导局部免疫耐受进展.docVIP

睾丸支持细胞介导局部免疫耐受进展机体的某些特殊部位在植入异体组织后不会发生排斥反应，且这些移植组织可长期存活，如眼、睾丸、脑等特殊区域，这些区域称为免疫豁免区[1]。免疫豁免区的组织若移植到其他部位，能抵抗排斥反应而存活，诱导局部产生免疫耐受。睾丸是天然的免疫豁免区，研究证实睾丸支持细胞（Sertoli cells，SC）是维持其免疫豁免功能的主要细胞[1]，共同移植SC可延长同、异体移植物的存活时间，因而，SC的免疫豁免特性倍受关注。现就SC共 移植在同、异体移植方面的进展综述如下。 1SC的免疫豁免功能 SC在体外可诱导异种淋巴细胞凋亡，而学者通过将从2～4周大SD大鼠收集来的SC与Balb/c小鼠淋巴细胞共培养，用流式检测细胞凋亡，FasL、转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）和丛生蛋白用免疫细胞化学检测，结果发现免疫细胞化学显示SC表达FasL、TGF-β1，并可诱导小鼠淋巴细胞凋亡的实验，提示SC表达的FasL及TGF-β1与异种移植的免疫豁免有关[2]。 1.1 SC高表达FasL:Fas(又称APO-1，CD95)是一个细胞表面分子，属于肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor， TNF）受体家族，是由325个氨基酸组成的I型膜蛋白， Fas的胞内区有一个约由70个氨基酸组成的保守区域，为凋亡信号转导所必需，称为死亡结构域，Fas在许多组织中表达，尤其是小鼠的胸腺、肝脏、心脏、肺、肾、卵巢等。Fas配体（Fas ligand，FasL）由281个氨基酸组成，为Ⅱ型膜蛋白，属于TNF家族。与TNF一样，FasL也可被膜上的金属蛋白酶加工成可溶性FasL。FasL主要表达活化的T细胞和自然杀伤细胞（natural killer cell，NK）。目前已通过免疫组织化学、逆转录酶PCR （reverse transcriptase polymerase chain reaction，RT-PCR）、原位杂交、Northern Blot等多种方法证明睾丸中支持细胞高表达FasL。 1.2 SC分泌免疫抑制因子:SC长期以来被认为在睾丸中具有调节免疫应答的作用，但以前的研究认为SC高表达FasL是其免疫豁免特性的来源，FasL/Fas系统是参与T细胞介导的移植物排斥的关键调控系统，移植物通过FasL有效地诱导前来攻击的淋巴细胞或粒细胞凋亡而保护自身，获得免疫豁免。但目前也有学者认为SC分泌的免疫调节因子，特别是TGF-β，在免疫豁免中具有重要作用[3]。TGF-β具有抑制B细胞分化为浆细胞；抑制NK细胞功能；抑制白细胞介素-2（inter leukin-2， IL-2）的产生和下调T 细胞上的IL-2受体等复杂的免疫调节能力。研究发现SC具有良好的分泌功能，可分泌多达100多种蛋白质，分泌的大量免疫抑制因子抑制T、B的活性及IL-2的产生[4]。除TGF-β外，其分泌的其他主要免疫调节因子的种类和作用如下： 白介素-1 (inter leukin-1 ，IL-1) ：IL-1包括两种由不同基因编码产生的分子量均为17kD左右的多肽分子， IL-1β主要是分泌型，人体内IL-1活性主要由IL-1β介导。它主要通过自分泌或旁分泌刺激其他的细胞因子和炎症介质产生（如IL-6, IL-B, TNF-β等）；诱导抗原提呈细胞表面免疫分子的表达，为T淋巴细胞的活化提供第二信号；促进B淋巴细胞的增殖、分化；介导免疫球蛋白的分泌，由此激活补体，杀伤细胞及吞噬细胞的活性，增强细胞免疫和体液免疫而介导组织损伤过程。胰岛素样因子II(insulin-like growth factor ，IGF-II) 抑制淋巴细胞增殖。抑制素(Inhibin) 刺激胸腺细胞分裂。活化素(Activin) 抑制胸腺细胞分裂。转铁蛋白(Transferrin) 替代血清使有丝分裂原刺激的T细胞在体外生长，促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone，GnRH) 诱导外周淋巴细胞产生LH样因子，层粘连蛋白(Laminin) 增加巨噬细胞的吞噬能力等。 2表达FasL基因在异体移植中的应用 组织正常表达的FasL能诱导免疫豁免的现象，促使人们探索利用基因工程技术人为诱导组织表达FasL来保护移植物的存活。 2.1在肝脏移植中：Li等将表达FasL的载体质粒（pFasL）以不同的剂量（90、180、270、360mg）经HVJ病毒转染到小鼠肝细胞中，术后3、5、7、14天检测FasL表达水平，结果发现只有转染了适量pFasL（10%）转染组小鼠存活，明显提高同种异体移植物的存活时间，移植物中可见浸润的活化T细胞凋