膜型血管内皮生长因子受体1在子痫前期及子痫中变化及意义.docVIP

膜型血管内皮生长因子受体1在子痫前期及子痫中变化及意义[摘要] 目的 研究膜型血管内皮生长因子受体1(膜型VEGFR-1)和VEGF在子痫前期及子痫患者胎盘组织中的定位及表达，探讨膜型VEGFR-1和VEGF与子痫前期及子痫发病的相关性。方法 采用免疫组织化学法检测研究组与对照组胎盘组织中膜型VEGFR-1和VEGF蛋白的表达。结果 VEGF和膜型VEGFR-1在胎盘的表达主要位于绒毛滋养细胞胞膜和绒毛毛细血管内皮细胞胞膜，间质有少量表达；研究组胎盘组织中VEGF和膜型VEGFR-1蛋白表达明显低于对照组(P＜0.01)。 结论 膜型VEGFR-1和VEGF蛋白在子痫前期及子痫患者胎盘组织中表达比对照组降低，推测子痫前期及子痫发病可能与胎盘膜型VEGFR-1表达有关。 [关键词] 子痫；子痫前期； VEGF； 胎盘； 膜型VEGFR-1 [中图分类号] R714.24+5 [文献标识码] A[文章编号] 1005-0515（2011）-11-060-01 子痫前期及子痫是导致孕产妇和围产儿病率及死亡率增高的主要原因。由于发病机制未完全明确，重度子痫前期及子痫往往需要结束分娩，故早期预测、诊断和适当处理可以改善母儿的预后。本研究应用介导VEGF生物学功能的膜型VEGFR－1为研究目标，用免疫组织化学的方法测定胎盘组织中膜型VEGFR－1及VEGF蛋白的定位及表达，旨在阐明子痫前期及子痫患者内皮细胞功能紊乱的相关因素，探讨膜型VEGFR－1及VEGF在子痫前期及子痫发病中的相关性，为临床上预测以及治疗子痫前期和子痫患者提供帮助。 1 资料与方法 1.1 一般资料 收集笔者所在医院2007年6月-2009年6月分娩的子痫前期及子痫患者24例作为研究组，其中包括子痫前期轻度患者9例，重度患者10例，子痫患者5例，子痫前期及子痫的诊断和分类依据乐杰主编的全国高等医学院校教材《妇产科学》第六版。随机选择同期在该院门诊就诊的正常妊娠妇女18例为对照组。两组孕妇均进行剖宫产分娩，妊娠前均无高血压、糖尿病、肝肾疾病、心血管疾病和其它产科并发症。两组孕产妇均于剖宫产时胎盘娩出后于胎盘母体面近脐带处，避开钙化区，立即取约1×1×1cm3大小组织1块，用冷生理盐水漂洗血液后，用10%的中性甲醛溶液固定，石蜡包埋，每个标本均做6μm连续切片共5片备用。 1.2 方法 采用链霉菌素-生物素(S-P)免疫组织化学染色方法检测膜型VEGFR－1及VEGF，用已知阳性片作为阳性对照，同时用PBS替代第一抗体作阴性对照。分析研究组各组与对照组胎盘组织中膜型VEGFR－1及VEGF蛋白定位及表达水平。免疫组织化学试剂：小鼠抗人VEGFR-1单克隆抗体：购自美国RD公司；小鼠抗人VEGF单克隆抗体：购自福州迈新生物技术开发公司；即用型免疫组织化学超敏VltraSentitiveTMS-P试剂盒：购自福州迈新生物技术开发公司。 1.3 结果判定 光镜(×200)下观察，细胞膜或(和)细胞质中有棕黄色颗粒为阳性染色。每张切片随机选取高倍(×200)视野10个，用高清晰彩色病理图像分析系统(HPIAS-100)测定切片图像的阳性反应平均灰度值，即滴加上述一抗后的每张阳性染色切片图像平均灰度值(包括绒毛组成区域背景区)与阴性对照切片图像的平均灰度值的差值。结果以平均灰度值±标准差表示。 1.4 统计学处理 所有测定数据用x±s表示，采用SPSS11.5软件包处理，对数据作方差分析，方差不齐时使用Jonckheere-Te rpstra 非参数检验；研究组各组与对照组胎盘VEGF、膜型VEGFR-1蛋白水平的比较用两样本t检验。 2 结果 2.1 膜型VEGFR－1蛋白在胎盘表达图像分析 对研究各组与对照组胎盘膜型VEGFR－1蛋白表达进行平均灰度图像分析，结果示研究组各组胎盘中膜型VEGFR－1平均灰度值较正常对照组低，研究组各组与对照组组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01)。见表1。 2.2 VEGF蛋白在胎盘表达图像分析 对研究组各组与对照组胎盘VEGF蛋白表达进行平均灰度图像分析，结果示研究组各组胎盘中VEGF平均灰度值较正常对照组低，研究组各组与对照组组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01)。见表1。 表1膜型VEGFR－1、VEGF在各组孕产妇胎盘中平均灰度值比较 注： *代表各研究组与对照组比较结果P＜0.01。 3 讨论 血管内皮生长因子是一种特异的、强烈的血管内皮细胞促分裂因子和血管生成因子，可以致内皮有丝分裂，维持血管的正常状态和完整性。在正常胎盘形成过程中，滋养叶细胞沿着螺旋小动脉逆行浸润，逐渐取代血管内皮，并使血管肌肉弹性层为纤维素样物质所取代，从而使血管腔扩大，