艾滋病在医院检测重要意义.docVIP

艾滋病在医院检测重要意义【中图分类号】R512.91 【文献标识码】A 【文章编号】1672－3783(2011)07－0376－02 【摘要】目的 探讨艾滋病在医院检测的重要意义。方法 将我院2003年6月至2010年6月收集的住院患者3770份血液标本，在单个血清检测结果未知的条件下进行混合血清ELISA法检测。结果 3770分血清中采用混合血清法检测出HIV阳性者32例，该32例患者采用Western Blot蛋白印迹法(WB)确诊31例，阳性率为0.82%，各科室间的HIV阳性无显著性差异，P0.05。结论 加强对住院患者的HIV检测力度，对预防医源性感染，防止医务人员职业暴露具有重要的意义。 【关键词】艾滋病；HIV；检测；意义 艾滋病(AIDS)，主要通过人免疫缺陷病毒HIV进行传播，被誉为“史后世纪的瘟疫”，严重威胁着人类的健康和社会的发展，现今已经发展成为全球性的流行病［1］。目前，我国艾滋病的传播速度正在加快，流行区域不断扩大，流行形势十分严峻，检测这一病源最常用的方法是HIV抗体的检测。医院是各种疾病患者聚集地，人口密度大，很容易造成医源性感染。有研究表明，住院患者的HIV阳性率要显著高于普通人群的筛查结果。为了解住院患者HIV的感染情况，有效的预防医源性传染。现对我院2003年6月至2010年6月收集的住院患者的3770份血液标本进行HIV阳性检测，报告如下。 1材料与方法 1.1血清标本:收集我院监测人群的3770份血液标本，抽取监测人群的清晨空腹留取外周静脉血3ml，于普通真空采血管中，静置10min，以6000r／min，离心10min。分离血清后吸取50μl放入无菌Eppendorf管内，放于后-70℃冰箱保存待检。另选400例健康体检者的血液标本进行HIV检测。 1.2实验方法 1.2.1试剂与仪器:HIV-1和HIV-2嵌合抗ENV18标记的过氧化物酶组成试剂盒由英科新创(厦门)科技有限公司提供，联免疫检测试剂盒购于上海科华生物技术有限公司，洗板机为郑州安图ANTHOS FLUIO自动洗板机；微量加样器，上海雷勃分析仪器有限公司生产，Western Blot蛋白印迹法检测试剂盒购自中山大学达安基因股份有限公司提供，DYCZ-24DN型电泳仪，ZS-3板式酶标仪，测定波长为450nm，参考波长为655nm。北京市六一仪器厂生产。 1.2.2检测方法:⑴混合血清检测：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中免疫血清学标志物；以5个标本为一组，构成混合标本，混合后加一定量稀释液，保证每份待检血清在混合血清稀释后的浓度与单独检测时浓度一致，进行混合血清检测，操作步骤按照试剂盒说明进行，全部阴性血清样品混合，1份弱阳性血清(≥于临界对照A值平均值)，其余均为阴性血清样品［2］。⑵Western Blot蛋白印迹法(WB)：BCA法测定各样品蛋白浓度，按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定各样品浓度，确定上样量，沸水浴5min后进行上样，进行电泳蛋白分离。SDS后的凝胶在转移缓冲液中漂洗后，用电转移仪转移到NC膜上（4℃，100V，1h）。将膜置于5%的脱脂奶粉封闭液中，37℃封闭2h。?封闭后的NC膜在TBST中摇床漂洗三次，每次10min。加入用抗体稀释液稀释的Actin抗体（1：1000稀释），4℃摇床上孵育过夜。TBST漂洗三次，每次10min。(TBST：含0.05% Tween-20 的TBS；抗体稀释液：5%脱脂奶粉）。加入5%脱脂奶粉稀释的辣根过氧化物酶标记的第二抗体（1：4000），室温摇床上温育1.5h。TBST漂洗三次，每次10min。将膜置于ECL 显色工作液中1～5min，吸去多余液体，将膜放入保鲜膜中包好于暗盒中压上胶片曝光数分钟。将胶片进行显影定影。 1.3统计学处理:采用SPSS 16.0软件，率的比较采用卡方检验，以P＜0.05为差异有统计学意义 2结果 3770分血清中采用混合血清法检测出HIV阳性者32例，采用Western Blot蛋白印迹法(WB)确诊31例，阳性率为0.82%。其中心外科6例(19.4%)，其他外科6例(19.4%)，肾内科5例(16.1%)，血液内科3例(9.7%)，其他内科4例(12.9%)，妇产科3例(9.7%)，其他5例(16.1%)，各科室间无显著性差异，P0.05。见表1。健康体检者为检测到HIV阳性病例，阳性率为0。 3讨论 近年来，HIV的筛查力度正在逐渐增大，且随着人们对艾滋病了解的深入，HIV感染已不再是一种致死性疾病，而是一种可以有效控制的慢性病。因此，加强对其的筛查有利于早期诊断、治疗，控制疫情［2］。本研究中采用的检测方法是混合血清EL