血管性血友病因子结构功能及在止血、血栓形成中作用.docVIP

血管性血友病因子结构功能及在止血、血栓形成中作用摘 要 血管性血友病因子(vWF)在止血和血栓形成过程中起重要作用。血浆中vWF为分子量不等的多聚体，vWF多聚体的大小与功能有密切关系，其分子量越大，与血小板结合能力越强，更能促进血小板聚集、血栓形成与微血管病性溶血。与血管性血友病因子裂解酶(vWF-cp)密切相关。因此研究vWF的生物学特性和功能具有重要意义。就vWF的生物合成，结构特点及生物学功能的研究进展作一综述。? 关键词 血管性血友病因子 结构 血小板 vWF-cp? vWF基因和蛋白的结构与功能? vWF主要由内皮细胞合成，但表达合成vWF的上皮细胞存在非常明显的异质性，血浆中vWF为分子量不等的多聚体。在蛋白质合成的初期，vWF经历了翻译后的修饰过程，包括二聚化与多聚化，以及D1～D2间的裂解。vWF的多种功能存在于不同的蛋白功能区里，如A1与vWF和血小板糖蛋白Ⅰb的结合有关，D3与vWF和FⅧ的结合有关，C2与vWF和血小板糖蛋白Ⅱb-Ⅲa受体的结合有关，A3与vWF和胶原的结合有关。vWF对凝血途径的调节主要通过：①作为分子桥介导血小板与内皮下胶原的粘附反应，这是通过血小板糖蛋白（GP） Ib-Ⅸ（vWF受体）和内皮下胶原成分精氨酸-甘氨酸-门冬酰胺（Arg-Gly-Asp，RGD）三肽结合；vWF还能粘附于受刺激的内皮细胞，这一作用是通过上皮细胞表面玻璃连接蛋白（αvβ3）和vWF分子上的RGD三肽位点结合而实现的。②作为分子桥介导血小板与血小板之间的聚集反映，这一作用主要通过血小板表面存在vWF受体，血小板膜糖蛋白（GP）Ib-Ⅸ Ⅱb-Ⅲa而实现。③作为凝血因子Ⅷ的保护性载体，即vWF可保护因子Ⅷ的活性，还能稳定因子Ⅷ的mRNA，促进因子Ⅷ的合成与分泌。? 血小板GP Ⅰbα上与vWF结合相关的重要区域? GP Ⅰb-Ⅸ-Ⅴ复合物为血小板受体，其主要功能是通过与vWf的结合引起血小板粘附，进而改变细胞骨架，引起血小板变形、移动、分泌、聚集和收缩等一系列变化。GP Ⅰbα是复合物中直接与vWF发生作用的部分。它们的相互作用是以上变化的始动环节。在病理性的和高切应力的条件下，这种相互作用则能引起血栓性疾病［1］。以往的大量研究主要是为了寻找vWF的精确结合位点，GP Ⅰbα氨基端晶体结构及其与vWFA1 区共结晶结构的发现成为该领域的重要进展。GPⅠbα与vWF直接接触的部位位于N端侧翼区、富含亮氨酸重复序列区和C端侧翼区。? vWF-cp与vWF关系? 研究表明，vWF-cp是具有凝血酶敏感蛋白模体的去整合素域和金属蛋白酶域蛋白(ADAMTS)家族中的一个新成员，命名为ADAMTS13［2］。vWF-cp的金属蛋白酶域是其活性域，能够将大分子量的vWF多聚体水解为小分子肽段。后者是介导血小板与内皮下组织粘附进而形成血小板血栓的重要分子，其中大分子量的vWF 多聚体与血板的结合能力更强。因此，vWF-cp主要调节vWF 的结构与功能。? 为进一步研究其活性区域特征，有人应用PCR方法从vWF-cp cDNA质粒中扩增出该酶的活性域，并进行克隆、表达和鉴定。即正常人血浆中存在的vWF降解片段，调节vWF与内皮下胶原和血小板等的粘附能力。其他结构域可能参与酶对底物或配体的识别及结合。vWF是人体内血栓形成与止血过程中的一个主要的糖蛋白，vWF-cp水解的敏感性异常或vWF-cp酶活性本身的异常,均影响vWF多聚体的形式，从而导致血栓栓塞性疾病或出血性疾病的发生。粗略估计vWF-cp在正常人血浆中的含量约为1μg/ml。妊娠期的后6个月该酶含量较前3个月减少，提示其合成可能受到高水平雌激素的影响。所以，研究vWF-cp结构与功能的关系对了解疾病发病机制有重要意义。近年来，发现在许多疾病状态下vWF-cp酶活性的缺陷或降低，同时也伴有vWF质或量的异常。? vWF介导血小板粘附的机制? 血液中的血小板始终在监视着血管壁的完整性，但由于高速流动的血流产生的剪切速率很大，假如没有vWF帮助，椭圆形的血小板很难抗拒血流而停下来。血管内皮损伤后，表面的内皮细胞脱落，血液与内皮下组织中胶原纤维相接触，首先起作用的是在血液中循环的vWF。因为它们呈线样结构，抗拒剪切力的能力比血小板强的多，AA和A3是vWF粘附的主要功能基团分别负责与GP Ⅰb和胶原的结合。vWF 分子中的A3结构域能够立即与内皮下暴露出来的胶原结合，并在剪切力的作用下，vWF发生伸展，使A1结构域暴露出来，被血小板上的GP Ⅰb受体识别。滚动的血小板上的GPⅠb受体与平铺在损伤部位的vWF分子中的A1结构域不断地结合、分离，使快速流动的血小板逐渐减速；在减速的过程中通过细胞内信息传递使其他受体也得