甲基百里酚蓝.pdfVIP

陕西医学幢验第9毒第 1期 1994年2月 23 z5～ 改 良甲基百里酚蓝血清钙微量测定法 R 、I1生 垄 熏 (广东顺越市中医院 528300 江西省临床检验中心) 提 要 采用尿素代替蔡乙嶂叶已略烷爵作 剜定的抗干扰 荆．能对血样本中鞋高浓度的膳质 ．蛋 白质代谢产抽、 茸萄耱 一血虹蛋 白夏胆虹素手具有鞋嵇的抗干扰 作用，同时加大 了试荆体未中8一羟喹宁的敢度 ，馒辑鞋高浓度 (1·64mmol／L 下) 的慑离于耐童实骚无干扰 ．从而增加 1本实验 的准确性和碡定性 。 关键调 里苎互里堕蒌 』耋 !苎 血清钙的测定 已在临床得 以广搓 的应用，以往多 衰 1 不同靶位质控袖测得结果趸分析系数 用EDTA滴定法，由于该法掌揖漓定终点存在较大的 主现差异 ．使血清钙的翻定结果产生一定的误差．以比 色法具有精密度高 ．简单快速 ．不需特殊的仪器等优 点．是较易推广应用的方法之一 ．比色法常用的显色荆 有 甲基百里 酚蓝 (Methylthymolb】ueCompleXon． MTB)和邻 甲酚酞培合烷 酮 (0一Cresolphthalein Comp】eXOTz，OCPC)等染料。 本法采用 的MTB显色测定血清钙 以往报道 “ 多采用聚乙烯吡咯娩酮 (Poly~inylphrro|idolie．PVP) 作血清中某些物质的抗干扰荆，实验表明 PVP在血 清中其它非钙物质的浓度较高时不能起刊完垒的抗干 衰 2 不同钙浓鹰线性衰 扰作用，为此笔者探索改 良MTB法 ，用尿素代替PVP 作抗干扰荆，效果较为满意。 1材料与方法 1．1试 荆 ①MTB显色液 古MTB0．2375mmol／L． 寰 3 不同钙浓鹰唇收结果衰 尿素 3otol／L，8--羟哇宁 28reotol／L．HC10．15otol／L。 @磕性试荆：乙醇胺 200ml／L、3otol／L尿 素溶藏加至 lL．@应用藏 ：将上述①、②等量混合 (用时临时配 制)。 1．2摊作 取样本、标准藏、米各 5ou1分别加入相应 的试管 内．各管加应用藏 3ml混匀．室温显色 lO分钟 ． 721分光光度计 618rim 波长比色记录哑光度。同时可 按样本与试荆 1：l90的比例在自动生化分析仪上测 定。 2结果 2．1精密度 分别用两种不同浓度 (靶值)的质控物 (由上海生物制品研究所提供)各测定 2o次结果见表 1。靶值为 1．87mmol／L的质控物作室内质控连续测定 2O天 (次)的结果为 ： =1．852mmol／L、=0．0424 CV=2．29 。 2．2线性 钙浓度在4reotol／L以下符合比尔定律 ．见 表 2。 ’ 2．3回收试骚 在 已知钙浓度的溶液中分别加入 0．5． 1．0．1．5，2．0mmol／L 的钙．测得 平均 回收 率 为 101．35 。见表 3。 圉 MTB--Ca”络合物嚷收光谱曲线 2．4吸收光谱 钙与MTB显色后 ．在 721分光光度计 2．5干扰试验 用分别古胆固醇 10．89mmol／L．甘曲 上，可见在 615~620nm处有一水平吸收峰 ，见圈。 三酯 2．43mmol／L、脂蛋白8．9g／I．、尿素氯 28．4reotol／ ， ， 24 陕西医学幢验第9誊第 1期 1994年 2月 L、肌 酐 1098umol／L、血 红 蛋 白 lBg／L、葡 萄 糖 8一羟喹宁可完垒阻止 1．64mmol／L镁离子与 MTB 16．3mmol／Ll及古胆红翥 ~07mmo]／L的血清各 50u1 显色．使至少 1．64mmol／L以下浓度的镁离子对钙测 分别加入含 3mr直用{直的试管中．待显色后用EDTA 定无影响。 — Nat作消色处理 ，与同样处理的空白管 比较．嗳光度 由于本法灵敏度高