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·医学简讯· 中国人体外重建表皮模型的建立和特征 皮肤作为重要的人体器官，是对机体存活至关重要的保 一、材料和方法 护性屏障。皮肤可以防止体内水分及矿物质的丢失，在机体 详见原文。 处于有害环境暴露时起到保护作用，如异物、微生物、紫外线 二、结果 和其他污染物。此外，皮肤具有多种功能，包括体温调节、感 觉、分泌排泄、产生维生素D 等。皮肤是一个具有多层结构的 1. 体外重建表皮模型与天然人体表皮的形态比较：使用 器官，最外层是由4 层结构组成的表皮，从内到外依次为基 HE 染色比较皮肤模型与源组织（即包皮组织）的形态。中国 底层、棘层、颗粒层和角质层。维持表皮的这种多层结构是保 人EpiSkin 模型表现出良好的分层结构，包括基底层、棘层、 持人体皮肤防御功能所必需的。 颗粒层和角质层。对这种模型的时序性发展进行了研究。可 表皮细胞中，＞ 90%为角质形成细胞，从基底层分布至 以观察到所有的重建表皮模型均完全分化，形成与正常人体 角质层，角质形成细胞经历一个逐步分化的过程，而当该细 表皮相似的多层表皮结构。基底层粘附在胶原基质上，该层 胞异常发育时则可导致多种皮肤病，然而表皮分化的潜在机 内的许多细胞呈立方形。基底层上是棘层，有4 ～ 5 层扁平 制尚未完全阐明。细胞或表皮模型被广泛应用于基础、应用 细胞。颗粒细胞因伴有明显的透明角质颗粒而易于识别。最 和临床研究。随着科技的发展，尤其是利用气 液交界面对角 上层是角质层，其厚度随培养时间的延长而增加。总之，中 质形成细胞展开的培养技术，使得在实验室条件下能够完成 国EpiSkin 模型具有与天然人体表皮高度相似的形态学特 体外重建的人表皮模型。随着Howard Green 对角质形成细胞 征。对于模型的运输过程以及在测试使用前进行恢复培养 培养技术的改进，大量的研究工作使用该技术对表皮的生长 过程的追踪研究表明，该表皮模型在运输之后仍能保持良 和分化进行了探索。 好的品质。 体外重建人体表皮模型已成为皮肤科和化妆品研究的 2. 表皮分化标记的表达和分布：除了形态学分析之外， 一项有用工具，可用于筛选化妆品原料和产品活性成分，评 生物学标记物已用于描述中国EpiSkin 模型在第6 天的分化 估其安全性和有效性。利用人表皮模型开发的检测方法已用 特征。与天然人体表皮一样，基底层标记角蛋白K14 仅在基 于对皮肤刺激性、腐蚀性和光毒性的评估。目前，经济合作与 底层表达。通过Ki67 免疫组化染色能够观察到角质形成细 发展组织（OECD ）在TG431 检测指南中已经接受了几种人表 胞的增殖，且位于基底层。中国EpiSkin 模型中增殖型角质形 皮模型（包括EpiSkin 模型）的测试方法，作为可完全替代动 成细胞的密度与天然表皮相似。早期分化标记角蛋白K10 表 物测试的参考方法（VRM ）。同时，EpiSkin 模型方法早已通过 达并定位于所有基底上层（suprabasal layers ）。透明角质的主 了欧盟替代验证方法中心（ECVAM ）科学咨询委员会的认证， 要组分丝聚蛋白定位于颗粒层。因此，在体外重建皮肤模型 作为一种完全取代2007 年Draize 急性皮肤刺激试验的替代 中所有相关的分化标记均有表达，并与天然人表皮中的位点 方法。在欧盟委员会检测方法EU B46 和OECD TG439 检测 相同。 指南中均采用EpiSkin 作为体外评估皮肤刺激的参考方法。 3. 中国人EpiSkin 模型角质层的脂质成分：表皮屏障功 不同种族人群的皮肤在某些方面可能具有不同的特征。 能对维持正常的表皮功能至关重要，而皮肤的脂质成分是表 有人研究了不同种族皮肤的角质层结构、屏障功能和刺激反 皮屏障功能的关