农杆菌介导的芦笋遗传转化体系的建立.pdfVIP

热带作物学报 2016. 37(8): 1494-1500 Chinese Joumal of Tropical Crops 农杆菌介导的芦笋遗传转化体系的建立 鹿志伟 12 ，侯晓婉 1 ，高建明 3 ，张燕梅 12 ，杨子平 12 ， 陆军迎 12 ，李俊峰 12 ，赵艳龙 1 ，周文钊1 气易克贤抽 1 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所，广东湛江 524091 2 湛江市热带作物遗传改良重点实验室，广东湛江 524091 3 中国热带农业科学院热带生物技术研究所，海南海口 571101 4 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，海南海口 571101 摘 要 以芦笋井岗 701 胚状体为试验材料，在构建 pCAMBIA33∞-35S-hevein-NOS 植物表达载体基础 上，采用农杆菌介导的转基因方法，探究菌液浓度、 AS 浓度、侵染时间和共培养时间等4 个因素对芦笋转基因 效率的影响，以期建立高效的芦笋转基因体系。结果表明:用菌液浓度。D时O札 AS 终浓度为 2∞ μmolJL的 农杆菌菌液进行侵染，侵染lOmin 后，暗培养4d 的转基因效率最佳，经 PCR 检测，阳性转化率达 21% ，获得 了转基因幼苗。本实验构建了完整的农杆菌介导的芦笋遗传转化体系。 关键词 芦笋;农轩菌介导;遗传转化体系 文献标识码 A 中图分类号 S制4.6 The Establishment of Agrobacterium-mediated Genetic Transformation System for Asparagus 1 1 12 LU Zhiwei 气 HOU Xiaowan , GAO Jianmin矿， ZHANG YanmeP气 YANG Ziping . , 1 12 1 1 4 LU Junying 气 U Junfeng . , ZHAO Yanlong , ZHOU Wenzhao 气 YI Kexian * 1 South Subtropical Crops instit脯， Chinese Academy ofTropical Agricultural Scie即es， 却呵四唱~G阳哪品。ng 524091, China 2 Tropical Crop Genetic Improveme 1Ú Key Lahoratory of Zhanj叫:， zhanj呵; Guan阱ng 524091, China 3 Institute of Trop町al Bioscience ood Biotechoology, CATAS, Haiko u, Hai 1UUl. 5刀101， China 4 Environme 1Ú ood PIant Protection Insti阳印， CATAS, Haiko u, Hai阳J1I 571101, China Abstract Em bryoids derived from asp町略us Jing伊ng 701 were chosen as the experimental materials. Wi由 construction of plant expression vector -pCAMBIA33∞ -35S -hevein -NOS，出e effects of liquid bacterial concentration,