1甘草素的研究现状及其应用.docVIP

甘草素的研究现状及其应用 张生元 （武汉中博水产生物技术有限公司，湖北，武汉，430070） 摘 要 本文扼要综述了甘草素(Liquiritigenin)的提取工艺、检测方法、药理功能、病害防治以及前景展望，以期为养殖生产和科研实践提供基础资料和参考依据。 关键词 甘草素；提取工艺；检测方法；药理功能；病害防治；前景展望 甘草(Glycyrrhiza)为豆科植物甘草属甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch)等的干燥根及根茎，是极为重要的一味中药材，其有效成分主要为三萜类化合物和黄酮化合物2大类，其中，甘草甜素是甘草酸及其甘草酸盐的通称，属五环三萜皂苷，含量为6 %-14 %[1]。甘草素和异甘草素(Isoliquiritigenin)为甘草中的两个重要黄酮类化合物，甘草黄酮类成分具有明显的抗氧化作用，可预防肿瘤发生，治疗胃溃疡、肝损害，在抗炎和抗变态反应等方面也有明显的药理作用[2-4]。甘草素具有天然、高效、毒副作用小、抗药性不显著、资源丰富以及性能多样化等优点[5-7]。本文就甘草素的提取、合成、检测及其应用作一综述。 1 甘草素的提取分离与化学合成 甘草素和异甘草素是甘草中两个重要的黄酮类化合物。甘草素有广泛的药理作用，具有抗炎、抗病毒、保肝解毒及增强免疫功能等作用，临床上被用于治疗各种慢性肝炎[8-10]，近年来，还被用于治疗肝纤维化等，研究甘草中甘草素的提取工艺具有重要的意义[11]。 1.1 甘草素的提取分离 甘草素在甘草中所占的质量分数不高，对原药材的处理有超声波、微波、酶法、半仿生法等多种辅助手段。常用的提取方法有溶剂提取法和超临界萃取等。 1.1.1 液液相萃取法分离 经粉碎的甘草10 kg，分批用95 %乙醇热萃取，萃取液合并浓缩得深棕色糊状物。将其转移在2000 mI烧杯中，用1000 ml蒸馏水热溶解，转移到3000 m1分液漏斗中，分别用石油醚、乙酸乙酯三次萃取。将乙酸乙酯萃取液合并浓缩至糊状后减压浓缩干，得黄棕色粉状物。在其加入硅胶，研细并为均一体，上硅胶H(300-400目)柱，用乙酸乙酯-石油醚(1: 7)洗脱。洗脱剂部分I、Ⅱ弃去，洗脱剂部分Ⅲ加入硅胶，研细并为均一体，再次上硅胶H柱，用氯仿-乙酸乙酯(5: 1)洗脱，洗脱部分I为甘草素，洗脱部分Ⅱ为异甘草素。 1.1.2 超临界CO2萃取 将抽提原料加入萃取器④，CO2用加压泵⑥从缓冲器中抽出，经加热器②加热到所需温度后送入萃取器。控制萃取器中CO2物位．使全部原料浸入其中。缓慢打开萃取器出口阀。萃取液经过滤器⑧流入分离器⑨。打开分离器CO2出口阀，使CO2缓慢气化。气化后的CO2再经冷却器①回流入缓冲器⑤。夹带剂经泵⑦从夹带剂贮缸加入萃取器。萃取完成后，关闭缓冲器CO2出口阀，停泵，将萃取器中萃取液全部放入分离器。缓慢回收分离器中CO2。待CO2回收完成后，打开分离器底部放料阀，放出萃取液。 图l 超临界CO2萃取甘草素简化流程图 l - 冷却器 2 - 加热器 3 - 夹带剂贮罐 4 - 萃取器 5 - 缓冲器 6 - 增压泵 7 - 泵 8 - 过滤器 9 - 分离器 在不同萃取体系下，甘草素的萃取率也不同。仅用CO2作溶剂，而不使用任何夹带剂时，甘草素不能萃取出来。用CO2作溶剂，用乙醇的水溶液作夹带剂时，则甘草素和异甘草素均可萃取出来，且随着乙醇浓度的增大甘草索的萃取率提高。进一步研究得出最佳萃取温度为40 ℃，压力为35 MPa，萃取体系CO2-H2O-C2H5OH与物料的重量比为4 - 5，萃取时间为5 h。 以上是提取甘草素的两种常用方法，各有优点，用液液相萃取法分离甘草素和异甘草素，有纯度高，工艺简单，成本低廉等优点。利用超临界技术萃取甘草素，可以缩短萃取时间，有效避免热敏性物质和易氧化物质的破坏，节省能耗，节省有机溶剂的用量。超临界萃取提高了对目标物质萃取的选择性，产物的品质好，对产品的后处理有利。是适合规模化生产的提取工艺。 实验室制取少量的甘草素等甘草黄酮类物质时，还可以采用高速逆流色谱快速分离，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1: 2: 1: 1)为溶剂系统，上相作为固定相，下相作为流动相，主机旋转方向为顺时针，转速850 rpm，流速4.0 ml/min，紫外检测器波长设置为254 nm。根据紫外吸收色谱图手动收集各馏分,所得甘草素纯度可达95 %以上。 1.2 甘草素的合成 甘草素的合成步骤为先合成异甘草素，再在一定条件下将异甘草素转变为甘草素，属于经典黄酮类化合物的合成。其合成路线如下： 1.2.1 傅氏反应制异甘草素 用乙氧羰基乙酰基保护 P-香豆酸上的羟基，制成酰氯，再与间苯二酚在三氯化铝催化下进行傅氏反应，制得异甘草素(IV)。 P-香豆酸(I)以对羟基苯甲醛和乙酸酐为