分子伴侣在蛋白质复性中的应用.pdfVIP

化学通报 2002 年 第65 卷 w52 分子伴侣及其在蛋白质复性中的应用** 张佳艺 关怡新 姚善泾* (浙江大学化学工程与生物工程学系 杭州 310027) 摘 要 E.coli 作为目前应用最为广泛的原核表达系统 在异体表达蛋白质的过程中容易形成 无活性的包涵体 蛋白质复性 即如何高效地将无活性的包涵体转变成为有活性的蛋白质 已成为 基因工程蛋白产业化的瓶颈 而利用分子伴侣的协助折叠特性进行的蛋白质复性技术正成为这一领 域的研究热点 本文针对这一技术 综述了分子伴侣的功能和种类 各种分子伴侣体系的作用原理 及在蛋白质复性中的应用情况 并简单介绍了人工分子伴侣 关键词 分子伴侣 复性 纯化 热休克蛋白 GroE Molecular Chaperone and Its Application in the Renaturation of Proteins Zhang Jiayi, Guan Yixin, Yao Shanjing (Department of Chemical and Biochemical Engineering Hangzhou 310027) Abstract Inclusion bodies are easily formed when recombinant proteins are expressed in E.coli system, and how to renature these inclusion bodies is now becoming the key problem in the genetic engineering. The protein refolding assisted by the molecular chaperone systems is promised to improve the protein renaturation efficiency. Some kinds of molecular chaperone systems and their functions as well were reviewed in this paper. Meantime, the mechanism and applications of molecular chaperone systems in the renaturation of proteins were presented. The artificial molecular chaperone systems were also briefly introduced. Key words Molecular chaperone, Renaturation, Purification, Heat shock protein, GroE 随着基因工程技术的发展 人们越来越多地利用成熟的原核 真核表达系统如大肠杆菌表 达系统 酿酒酵母表达系统来生产有用的重组蛋白, 若采用较强的启动子 在这些表达系统中 外源基因能够获得较高的表达量 但除了少数重组蛋白本身含有信号肽 如人表皮生长因子 能够分泌到胞外去 大部分的重组蛋白 如酵母羟肽酶 Y 蝎毒 Cn5 等 都是胞内产物 很容 易在胞内形成无活性的包涵体 据估计 在大肠杆菌表达体系中 其表达的产物大约有 80% 以 上是以包涵体形式存在的 因此 如何从包涵体中得到所需的有活性的重组蛋白 是基因工程 技术实现产业化的最重要的一步 近几年来 如何将无活性的包涵体转变成为有活性的蛋白 即蛋白质复性 已成为生物技 术领域的热门话题之一 出现了各种复性方法 其中包括用高效液相色谱柱 HPLC