第十章分光光度法-20130513.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * §10.4.1 测量波长的选择和标准曲线 （1）测量波长的选择 为了使测定结果有较高的灵敏度，应选择被测物质的最大吸收波长的光作为入射光，这称为“最大吸收原则”。选用这种波长的光进行分析，不仅灵敏度高，且能减少或消除由非单色光引起的对朗伯-比尔定律的偏离。 但是，在最大吸收波长处有其他吸光物质干扰测定时，则应根据“吸收最大，干扰最小”的原则来选择入射光波长。 例 丁二酮肟光度法测钢中镍，络合物丁二酮肟镍的最大吸收波长为470 nm，但试样中的铁用酒石酸钠掩蔽后，在470 nm处也有一定吸收，干扰镍的测定。为避免铁的干扰，可以选择波长 520 nm进行测定，虽然测镍的灵敏度有所降低，但酒石酸铁不干扰镍的测定。 定性分析和定量分析的基础 根据物质对光的最大吸收波长，可进行定性分析。 一定的实验条件下，物质对光的吸收与物质的浓度成正比。根据物质对光的吸收多少可进行物质的定量分析。 Curve Absorption Spectrum 标准曲线(calibration curve ) 制作标准曲线的方法为 在选择的实验条件下分别测量一系列不同含量的标准溶液的吸光度，以标准溶液中待测组分的含量为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得到一条通过原点的直线，称为标准曲线，此时测量待测溶液的吸光度，在标准曲线上就可以查到与之相对应的被测物质的含量。 A 0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 0 2.0 4.0 6.0 8.0 10 mg/mL §10.4.2 对朗伯-比尔定律的偏离 在吸光光度分析中，经常出现标准曲线不呈直线的情况，特别是当浓度较高时，标准曲线明显弯曲。 偏离比尔定律的主要原因有： 非单色光引起的偏离 介质不均匀引起的偏离 由于溶液本身的化学反应(解离、缔合、形成新化合物或互变异构等化学变化)引起的偏离 §10.4.3 吸光度测量的误差 在吸光光度分析中，仪器测量不准确也是误差的主要来源。这些误差可能来源于光源不稳定，实验条件偶然变动，读数不准确等。 在光度计中，透射率的标尺刻度均匀。吸光度标尺刻度不均匀。对于同一仪器，读数的波动对透射率为一定值；而对吸光度读数波动则不再为定值。 吸光度越大，读数波动所引起的吸光度误差也越大吸光度A在0.2-0.8之间，测量的相对误差较小，A=0.434（即T=36.8%）时，测量的相对误差最小。 吸光度读数与相对误差 若在测定吸光度A时产生了一个微小的绝对误差dA，则测量A的相对误差为： 根据Lambert-Beer定律可得， 微分后得，所以可得： 所以, 根据Er与T作图可知，当A=0.434时，测量的相对误差最小，在A为0.2~0.8范围内，相对误差较小。 吸光度范围的选择 从仪器测量误差的角度来看，为使测量结果得到较高的准确度，一般应控制标准溶液和被测试液的吸光度在0.2~0.8范围内。可通过控制溶液的浓度或选择不同厚度的吸收池来达到目的。 §10.5 其他吸光光度法 紫外可见分光光度法是测定无机离子和有机化合物的有力手段。 分光光度法的特点：（1）灵敏度高，常用于测定试样中1%～10-3%的微量组分，甚至可测定低至10-4～10-6%的痕量组分。（2）准确度较高。（3）操作简便、快速，仪器结构比较简单，成本低。 分光光度法应用十分广泛，几乎所有的无机离子和许多有机化合物都可以直接或间接地用分光光度法进行测定。此外，分光光度法在对多组分分析以及研究化学平衡、络合物的组成等方面(如络合物形成常数，酸碱离解常数的测定)都有广泛的应用。 §10.5 .1 目视比色法 用眼睛观察、比较溶液颜色深度以确定物质含量的方法。优点是操作简便，适宜于野外和现场快速测定。可在复合光-白光下进行测定，某些不符合朗伯-比尔定律的显色反应，仍可用该法进行测定。主要缺点是准确度不高，标准系列不能久存，需要在测定时临时配制。 标准系列: (分别取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL标准溶液 5.0mg/mL ) 试样 §10.5 .2 示差吸光光度法（differential spectrophotometry ） 吸光光度法一般仅适用于微量组分的测定，当待测组分浓度过高或过低，会引起很大的测量误差，导致准确度降低。示差吸光光度法可克服这一缺点。 示差吸光光度法用比待测溶液浓度稍低的标准溶液作参比。设参比溶液浓度为cs，待测溶液浓度为cx。 DA与Dc成正比。 示差吸光光度法的误差 §10.5.3 双波长吸光光度法(double-wavelengh) 两束不同波长的单