鳞癌细胞增殖能力与岩藻糖基转移酶表达水平及糖蛋白岩藻-大学化学.PDF

ＩＳＳＮ　 １００７⁃７６２６ 中国生物化学与分子生物学报　 ｈｔｔｐ：／ ／ ｃｊｂｍｂ．ｂｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ ２０１６年７月 ＣＮ　 １１⁃３８７０／ Ｑ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ３２（７）：８３０～８３６ ＤＯＩ：１０１３８６５／ ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｂｍｂ 鳞癌细胞增殖能力与岩藻糖基转移酶表达水平 及糖蛋白岩藻糖基化修饰有关 １） １） １），３） １），３） 朱雨彤 ，　 佟少明 ，　 张叶军 ，　 邹　 伟 ，　 李洪艳１），３）∗，　 燕　 秋２）∗ １） ２） （ 辽宁师范大学生命科学学院，大连　 １１６０８１； 大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室，大连　 １１６０４４； ３）辽宁省生物技术与分子药物研发重点实验室，大连　 １１６０８１） 摘要　 岩藻糖基转移酶（ｆｕｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｓ，ＦＵＴｓ）是一类催化糖蛋白和糖脂发生岩藻糖基化（修 饰）酶，主要包括ＦＵＴ１～ＦＵＴ９。 已有研究证明，很多癌组织中都有不同ＦＵＴ基因表达升高的现象。 本研究证明，表皮鳞癌细胞的增殖能力与几种ＦＵＴ基因表达水平有关。 本文比较研究了人表皮鳞 癌Ａ４３１和ＳＣＣ１２ 细胞的增殖速度和几种ＦＵＴ 的表达状况，以揭示鳞癌细胞增殖能力与几种ＦＵＴ 基因表达水平的关系。 细胞倍增时间结合ＭＴＴ 法揭示，鳞癌Ａ４３１细胞的倍增时间约为２６ ｈ，而鳞 癌ＳＣＣ１２ 细胞的倍增时间约为３３ ｈ（Ｐ ＜ ００５），提示Ａ４３１细胞增殖速度比ＳＣＣ１２ 细胞明显加 快。 与增殖速度一致的是，Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹显示，Ａ４３１ 细胞中与ＤＮＡ 合成相关的增殖细胞核抗原 （ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ ｃｅｌｌ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）蛋白表达水平比ＳＣＣ１２ 细胞高。 实时定量ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）检 测ＦＵＴ１⁃９基因ｍＲＮＡ转录本，揭示Ａ４３１细胞中几种ＦＵＴ基因的ｍＲＮＡ 水平均显著高于ＳＣＣ１２ 细胞。 凝集素免疫印迹法和Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹法进一步证明，Ａ４３１细胞中总蛋白的岩藻糖基化水平比 ＳＣＣ１２ 细胞中的明显升高。 敲低ＦＵＴ４基因表达后，Ａ４３１ 细胞中ＬｅＹ 寡糖的表达水平下调，细胞 增殖被明显抑制。 这些结果证明，较强的表皮鳞癌细胞增殖能力可能与几种ＦＵＴ基因的高表达， 以及糖蛋白的岩藻糖基化（修饰）相关。 岩藻糖基转移酶表达水平与临床表皮鳞癌的恶性增生的 相关性有待进一步证明。 关键词　 鳞癌细胞；增殖；岩藻糖基转移酶；岩藻糖基化 中图分类号　 Ｑ２９１；Ｒ３４；Ｒ７３⁃３６ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｓｑｕａｍｏｕｓ Ｃａｒｃｉｎｏｍａ Ｃｅｌｌｓ ｉｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｆｕｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｓ ａｎｄ Ｆｕｃｏｓｙｌａｔｅｄ Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓ １） １） １），３） ＺＨＵ Ｙｕ⁃Ｔｏｎｇ ，ＴＯＮＧ Ｓｈａｏ⁃Ｍｉｎｇ ，ＺＨＡＮＧ Ｙｅ⁃Ｊｕｎ ， ＺＯＵ Ｗｅｉ１），３） ，ＬＩ Ｈｏｎｇ