一株杀虫抗生素产生菌的筛选鉴定及活性物质稳定性研究.PDF

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００７，２７（４）：５４～５８ 一株杀虫抗生素产生菌的筛选、鉴定 及活性物质稳定性研究 １ １，２ １ １ １ １ 李　涛　覃拥灵 　陈桂光　李　楠 　张云开　梁智群 （１广西大学生命科学与技术学院　南宁　５３０００４　２河池学院化学与生命科学系　宜州　５４６３００） 摘要　通过卤虫初步筛选及家蚕复筛，从土壤中筛选到一株产高杀虫活性物质菌株ＧＸ２９。根据其理 ? 化特征及１６ＳｒＤＮＡ序列分析结果，确认该菌株为极暗黄链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｆｕｌｖｉｓｓｉｍｕｓ）。利用卤虫活 性追踪对其活性物质稳定性进行初步研究，结果表明温度、紫外线对其杀虫活性影响不显著；中性及偏 碱性条件下，其杀虫活性稳定。 关键词　杀虫活性　筛选模型　鉴定　稳定性 中图分类号　Ｓ４８２．７ 　　近年来，随着工农业生产的不断发展，化学农药的 动灭菌锅、ＨＨ４数显恒温水浴锅、ＳＨＢ 循环水式多 ? ?Ⅲ 种类、数量不断增加，给人类、社会、环保等带来严重危 用真空泵、ＲＥ５２Ａ旋转蒸发器、ＤＮＡ水平电泳仪、ＭＪ ? ［１］ 害，生物农药是解决这一问题的途径之一 。杀虫抗 ＲｅｓｅａｒｃｈＰＴＣ２００ＰＣＲ扩增仪。 ? 生素是一种生物源杀虫剂，具有高效、低毒、选择性强、 １．１．４　培养基及人工海水［３～５］　分离培养基（ｇ／ｌ）： 对环境无公害等特点，其本质是对有害生物的靶点产 可溶性淀粉２０，ＫＮＯ １，ＮａＣｌ０．５，ＫＨＰＯ４１，ＭｇＳＯ · ３ ２ ４ 生作用，因此又不同于某些昆虫的病源真菌通过寄生 ７ＨＯ０．５，ＦｅＳＯ ０．０１，ＫＣｒＯ ０．２５，琼脂 ２０，ｐＨ７．２ ２ ４ ２ ２ ７ 产生杀灭作用而显得药效迟缓。这种环境相容性好且 ～７．４。 药效迅速的特殊生物农药，是有害生物综合治理不可 　　高氏一号固体培养基（ｇ／Ｌ）：可溶性淀粉 ２０， ［２］ ＫＮＯ １，ＮａＣｌ０．５，ＫＨＰＯ １，ＭｇＳＯ ·７ＨＯ０．５， 缺少的重要手段，是无公害作物中首选农药之一 。 ３ ２ ４ ４ ２ 　　本文从杀虫抗生素产生菌的筛选、鉴定到杀虫活 ＦｅＳＯ０．０１，琼脂２０，ｐＨ７．２～７．４。 ４ 性物质的稳定性方面做了系统的研究。以期寻找有应 　　发酵培养基：为高氏一号液体培养基。 用前景的菌株。 　　人工海水（孵化卤虫卵用）（ｇ／Ｌ）：ＮａＣｌ２６．５， ＭｇＣｌ２．４５，ＭｇＳＯ ３．３１，ＣａＣｌ１．４１，ＮａＨＣＯ ０．２０， ２ ４ ３