分子生物学2009-2010-09-翻译-核糖体与翻译过程.DOC

教学单元教案格式 9 第4章 翻译之核糖体和过程 课程教案 授课题目：第4章 核糖体和翻译的过程 教学时数： 2 授课类型： 理论课 □ 实践课 教学目的、要求： 理解：核糖体的结构特征和生物功能、翻译的过程 掌握：核糖体的结构、活性中心、功能 了解：蛋白质输出、运输、定位的意义 加工的方式、作用、类型 教学重点： 重点阐明：核糖体的结构特征和生物功能、翻译的过程 重点指出：核糖体的结构、活性中心、功能 教学难点： 绝对难点：翻译的动态过程 相对难点：无 教学方法和手段： 老师讲授为主：讲授 视频演示 PPT演示 讨论。以电脑幻灯片边演示边讲述为主，（白板课件）辅以板书（黑板板书） 学生回答问题为辅：（如时间等条件许可的情况下） 注：以下内容按实际需要进行取舍 要求有多媒体，因为信息量大，许多结构图需要媒体放映，效果才好 第讲 1. 核糖体的结构与功能 （一）核糖体的结构 核糖体包括两个大亚基，每个亚基包括一个主要的rRNA分子和一些较小的RNA以及许多不同功能的蛋白质分子，这些分子大部分以单拷贝存在。 这些蛋白质称为核糖体蛋白，分别构成了核糖体的活性中心 （二）核糖体的功能 唯一的功能：合成蛋白质 （三）活性中心 2.蛋白质合成的过程 氨基酸的活化 翻译的起始 肽链的延伸 肽链的终止 蛋白质前体的加工 (一)氨基酸的活化 3、拼接酶系识别的就是这个二级结构 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。 氨基酰-tRNA的表示方法： Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet 原核生物和真核生物的起始氨基酸是有区别的 原核生物中，起始氨基酸是：甲酰甲硫氨酸 起始AA-tRNA是： fMet-tRNAfMet 真核生物中，起始氨基酸是：甲硫氨酸 起始AA-tRNA是： Met-tRNAMet 第一步反应 氨基酸 ＋ATP-E —→ 氨基酰-AMP-E ＋ AMP ＋ PPi 第二步反应 氨基酰-AMP-E ＋ tRNA —→ 氨基酰-tRNA ＋ AMP ＋ E tRNA与氨基酰-tRNA合成酶结合的模型 (二)翻译的起始 原核生物（细菌）为例： 所需成分：参见page127 30S小亚基、 50S大亚基、模板mRNA、 fMet-tRNAfMet、GTP、Mg2+ 翻译起始因子：IF-1、IF-2、IF-3、 翻译起始(翻译起始复合物形成)又可被分成3步： （参见page130） 1-1. 30S小亚基首先与起始因子IF-1,IF-3结合，核蛋白体大小亚基分离， 1-2、30S小亚基通过SD序列与mRNA模板相结合。 2.在IF-2和GTP的帮助下， fMet-tRNAfMet进入小亚基的P位，tRNA上的反密码子与mRNA上的起始密码子配对。 3、带有tRNA、mRNA和3个翻译起始因子的小亚基复合物与50S大亚基结合，GTP水解，释放翻译起始因子。 真核生物翻译起始的特点（与原核的差异） ●核糖体较大,为80S； ●起始因子比较多； ● mRNA 5′端具有m7Gppp帽子结构 ● Met-tRNAMet 不甲酰化 ● mRNA的5′端帽子结构和3′端polyA都参与形成翻译起始复合物； 扫描模型 解释了 小亚基与mRNA的识别过程 真核生物中40S小亚基首先与Met-tRNAMet相结合，然后通过帽子结合蛋白，与mRNA的5’端结合，然后沿着mRNA滑动，这是一个扫描的过程，直至遇到AUG序列，才能够稳定结合。之所以能够稳定结合可能是因为Met-tRNAMet 的反密码子与AUG配对的结果。最后与60S大亚基结合生成80S·mRNA·Met-tRNAMet起始复合物（P132）。 (三)肽链的延伸 肽链延伸由许多循环组成，每加一个氨基酸就是一个循环，每个循环包括：AA-tRNA与核糖体结合（进位）、 肽键的生成（成肽） 和 移位。 延伸因子(elongation factor, EF) ： 原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts) EF-G 真核生物：EF-1 、EF-2 1、延伸第一步：进位：AA-tRNA与核糖体A位点的结合。 需要消耗GTP，并需EF-Tu、EF-Ts两种延伸因子。通过延伸因子EF-Ts再生GTP,形成EF-Tu?GTP复合物 EF-Tu-GDP+ EF-Ts →→ EF-Tu-Ts + GDP EF-Tu-Ts + GTP →→ EF-