三疣梭子蟹雌激素相关受体基因在蜕皮过程中的-上海海洋大学学报.pdfVIP

文章编号：１６７４－５５６６（２０１６）０３－０３２１－０８ ＤＯＩ：１０．１２０２４／ｊｓｏｕ．２０１５０８０１５２８ 三疣梭子蟹雌激素相关受体基因在蜕皮过程中的表达分析 １，２ １，２ ３ １ ３ １，２ 陆　洋 ，吴旭干 ，潘桂平 ，王　伟 ，候文杰 ，成永旭 （１．上海海洋大学 水产种质资源发掘与利用教育部重点试验室，上海　２０１３０６；２．上海海洋大学 水产动物遗传育种上 海市协同创新中心，上海　２０１３０６；３．上海市水产研究所，上海　２００４３３） 摘　要：雌激素相关受体（ＥＲＲ）在甲壳动物蜕皮过程中可能起着重要的调节作用，但是尚不清楚该基因在三 疣梭子蟹不同组织和不同蜕皮阶段的表达模式。本文采用荧光定量ＰＣＲ（ｑＲＴＰＣＲ）技术研究了三疣梭子蟹 雌激素相关受体（ＰｔＥＲＲ）基因在不同组织和不同蜕皮阶段的表达情况。结果表明，ＰｔＥＲＲｍＲＮＡ在Ｃ期三疣 梭子蟹的Ｙ器官和鳃中表达水平最高，其次眼柄和胃中表达水平也相对较高，在３种肌肉组织和三角膜中表 达水平较低。在不同蜕皮阶段，１３种组织中的ＰｔＥＲＲｍＲＮＡ表达水平均差异显著。Ｙ器官中ＰｔＥＲＲｍＲＮＡ 从ＡＢ期到Ｅ期呈显著上升趋势；胸神经节和眼柄中的ＰｔＥＲＲｍＲＮＡ变化模式均为先上升后下降趋势，大颚 器中的ＰｔＥＲＲｍＲＮＡ变化趋势为先下降后上升；大螯肌肉、附肢肌肉和三角膜中的ＰｔＥＲＲｍＲＮＡ表达水平均 呈显著升高趋势，而腹部肌肉中ＰｔＥＲＲｍＲＮＡ为先下降后上升趋势；就消化代谢器官而言，胃、肝胰腺和鳃中 ＰｔＥＲＲｍＲＮＡ在整个蜕皮周期中均为先升高后降低的趋势，其中Ｄ期达最高值；肠道中ＰｔＥＲＲｍＲＮＡ相对表 达量在Ｄ期最高，Ｃ期和Ｅ期较低；从ＡＢ期至Ｅ期，心脏中ＰｔＥＲＲｍＲＮＡ表达水平一直显著增加，每期增加 １倍左右。综上，ＰｔＥＲＲ主要在Ｙ器官、鳃、眼柄和胃中表达，可能参与调控蜕皮过程、细胞增殖和能量代谢 等。 关键词：三疣梭子蟹；蜕皮周期；雌激素相关受体；表达分析 中图分类号：Ｓ９１７　　　文献标志码：Ａ 　　雌激素相关受体（ｅｓｔｒｏｇｅｎｒｅｌａｔｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ， ）５个物种ＥＲＲ的ｃＤＮＡ序列，尚未见甲 ｊａｐｏｎｉｃｕｓ ＥＲＲ）属于核受体超家族成员，是与雌激素受体 壳动物体内该基因表达模式及其与生长发育关 （ｅｓｔｒｏｇｅｎｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＥＲ）密切相关的孤儿核受体， 系的研究报道。 参与调控动物能量代谢、细胞增殖分化和性腺发 甲壳动物通过蜕皮实现生长，蜕皮是一个高 育等多种生理过程，在人类、小鼠、斑马鱼和果蝇 度耗能的生理过程，涉及到细胞增殖、凋亡分化 等动物中已经发现多种ＥＲＲ，其具体调控机制也 和能量代谢等［７－１０］，由于ＥＲＲ基因参与了昆虫 在逐步被解析［１－４］。众多研究表明参与雌激素信 的生长发育和能量代谢等过程［４，１１］，因此，推测 号通路调控是ＥＲＲ重要的调控路径之一［５－６］，有 ＥＲＲ在甲壳动物蜕皮过程中也具有非常重要的 关其准确的调控路径和基因功能尚不清楚。尽 作用。三疣梭子蟹是我国重要经济蟹类之一， 管ＥＲＲ在动物生长发育过程中具有重要的生物 ［１２］ ２０１３年全国养殖总产量达 １１万吨左右 。三 学功能，但有关甲壳动物ＥＲＲ的研究极少，目前 疣梭子蟹养殖过程中的蜕皮死亡综合征（ｍｏｌｔｉｎｇ ＮＣＢＩ 中 仅 见 三 疣 梭 子 蟹 （Ｐｏｒｔｕｎｕｓ ｄｅａｔｈｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＭＤＳ）是该养殖产业面临的重要 ｔｒｉｔｕｂｅｒｃｕｌａｔｕｓ）、拟穴青蟹（Ｓｃｙｌｌａｐａｒａｍａｍｏｓａｉｎ）、 问题之一，其形成原因非常复杂［１３－１４］，深入探讨 飞 马 哲 水 蚤 （Ｃａｌａｎｕｓｆｉｎｍａｒｃｈｉｃｕｓ）、水 蚤 三疣梭子蟹