萨罗罗非鱼nkcc1α基因cdna克隆及mrna组织表达差异.pdfVIP

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2017-08-30 发布于天津
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萨罗罗非鱼nkcc1α基因cdna克隆及mrna组织表达差异

动物学研究 2010，Dec. 31(6): 601−609 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research DOI ：10.3724/SP.J.1141.2010.06601 萨罗罗非鱼NKCC1α基因 cDNA 克隆及mRNA 组织表达差异范武江, 李思发* (上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室, 上海 201306) 摘要：在鱼类适应盐度变化的过程中, 鱼鳃是进行渗透调节的主要器官, NKCC1α基因是保持鳃丝氯细胞渗透 + + – 平衡的关键离子转运器, 以1Na :1 K :2Cl 的比例进行电中性转运。萨罗罗非鱼(Sarotherodon melanothern)是耐盐强的广盐性鱼类之一。该文通过快速扩增 cDNA 末端的方法, 首次从萨罗罗非鱼鳃丝组织中分离出 NKCC1α 基因cDNA 全长序列, 其开放阅读框(ORF)包含1 151 个氨基酸残基。多重比对和聚类分析结果表明, 该试验获得的基因序列与莫桑比克罗非鱼、鲑及鳗鲡的 NKCC1α 最为相似, 其中萨罗罗非鱼与莫桑比克罗非鱼相似性最高 (99%) 。预测萨罗罗非鱼NKCC1α蛋白质二级结构包含10 个跨膜螺旋, 这些跨膜螺旋的氨基酸序列及其布局都非常保守; 应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测鳃、肝、肠、肾NKCC1α mRNA 相对含量, 这4 种组织间差异显著; 盐度显著影响NKCC1α在鳃组织中的表达, 在136 盐度下NKCC1α mRNA 相对表达水平为0 盐度下的4.9 倍, 差异极显著 (P0.001), 显示NKCC1α基因与萨罗罗非鱼的耐盐性能密切相关。关键词：萨罗罗非鱼; NKCC1α; 耐盐; 渗透调节; qRT-PCR 中图分类号：Q785; Q959.499; Q516 文献标志码：A 文章编号：0254-5853-(2010)06-0601-09 + + − cDNA cloning and tissue-differential expression of Na /K /2Cl − cotransporter 1-α isoform in Sarotherodon melanotheron * FAN Wu-Jiang, LI Si-Fa (Key Laboratory of Aquatic Genetic Resources and Utilization Certificated by the Ministry of Agriculture,Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China) Abstract: The gills are the major apparatus for osmoregulation