头花蓼对H.pylori相关性胃炎细胞增殖、凋亡的影响和其机制的探讨.pdfVIP

贵阳医学院2014 届硕士研究生论文 《中国图书资料分类法》分类号：R378 单位代码：10660 学 号：S110138 贵阳医学院 2014 届硕士学位论文 头花蓼对H.pylori 相关性胃炎细胞增殖、 凋亡的影响及其机制的探讨 研 究 生： 谢小琴 导 师： 罗昭逊 副教授 年 级： 2011 级 专 业： 临床检验诊断学 2014 年 1 月 15 日 贵阳医学院2014 届硕士研究生论文 目 录 摘 要 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 1 前 言 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 2 材料与方法 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 4 结 果 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ X 讨 论 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ X 结 论 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ X 参考文献 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ X 英文摘要 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ X 致 谢 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ X 略缩词表 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ X 论文原创性声明 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„ X 附：综 述 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ X 贵阳医学院2014 届硕士研究生论文 头花蓼对H.pylori 相关性胃炎细胞增殖、凋亡的影响极其机制的探讨 专业名称：临床检验诊断学 研 究 生：谢小琴 导 师：罗昭逊 副教授 摘 要 目的：复制幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori，H. pylori)感染胃粘膜上 皮细胞（Human gastric epithelial cells，GES-1）细胞模型，观察头花蓼对 其周期、凋亡的影响，为头花蓼进一步开发利用提供实验依据。 方法：培养人胃粘膜上皮细胞（GES-1），采用 MTT 法观察细胞的增殖情况 并绘制生长曲线。取对数期细胞与不同浓度头花蓼（8 μg/mL、16 μg/mL、32 μg/mL、 64 μg/mL、128 μg/mL、256 μg/mL、512μg/mL、1024μg/mL）共同培养48h，计 算细胞生长抑制率。将细胞细菌不同比例 （1：20 ；1:50；1:100；1:200）共培养 数小时，以确定构建H.pylori 相关性胃炎细胞(Helicobacter pylori-associated gastritis cell,HAG)模型的合适比例及时间。对上清液进行H.pylori 快速尿素 酶、微需氧培养及 IL-8 的检测，鉴定感染细胞模型是否构建成功。模型构建成 功后，将实验分为3 组：空白对照组：不加H.pylori 不加头花蓼的GES-1 细胞组； 模型对照组：加H.pylori 的GES-1 细胞组；药物组：加H.pylori 加头花蓼的GES-1 细胞组，分别于加药后24h、48h、72h 收集各组细胞制成细胞悬液。采用流式细 胞仪观察细胞周期分布、凋亡情况；采用RT-PCR 法检测p38MAPK、JAK2、STAT3、 NF- κBp65、Bax、Bcl-2 表达水平，以观察头花蓼对人胃粘膜上皮细胞凋亡相关 基因表达的影响。 结果：1.GES-1 细胞生长曲线显示：细胞于培养的48h 进入对数生长期，120h 进入平台期。2.头花蓼浓度高于64µg/mL 时，细胞