胰岛素生物黏附性壳聚糖凝胶的鼻腔给药.docVIP

胰岛素生物黏附性壳聚糖凝胶的鼻腔给药 摘要： 近来有许多研究开始针对于壳聚糖生物黏附凝胶用于胰岛素鼻腔给药，采用鼻腔灌注试验进行毒性和四个吸收促进剂的研究：皂角甙，sodium deoxycholate，ethylendiamine，EDTA和卵磷脂。凝胶包括了4000lu/dl胰岛素，2%或4%的低或中等分子量的壳聚糖，卵磷脂或EDTA。药物释放可以通过无膜扩散方法研究，生物黏附性通过改良的张力测定，最优化的凝胶通过糖尿病大鼠鼻腔制备。血浆胰岛素水平通过胰岛素酶免疫测定工具分析，血浆糖水平通过葡萄糖氧化酶方法测定。处方包括2%低分子量含EDTA的壳聚糖，与含4%的含卵磷脂的中等分子量壳聚糖凝胶相比，具有高释放百分比，分散效率2.5%，低的T50%（释放50%的药物所需要的时间），平均溶出时间和生物黏附性。胰岛素从凝胶中零级动力学释放。2%的含EDTA的中等分子量壳聚糖能使胰岛素吸收的增加，静脉中葡萄糖水平下降46%。考虑我们体内外的研究，我们提出的凝胶处方是一个胰岛素鼻腔控释给药有用的制剂。 关键词： 吸收促进剂，壳聚糖凝胶，胰岛素，鼻腔给药，灌注 鼻腔给药是全身给药的最引人注意的途径之一。因为非胃肠道给药用于慢性治疗有很多缺点，鼻腔动脉血管丰富，因此药物可以快速吸收，组织高渗透，快速起效，给药方便，为大多数人所熟悉，适于慢性病药物治疗和避免首过效应的代谢。然而近来这种途径明显可以用于不稳定的，只能通过非胃肠道途径给药的药物。例如，狗的胰岛素鼻腔给药，血中免疫反应性胰岛素水平有显著的提高，而且，鼻腔中胰岛素的吸收可以通过加入吸收促进剂来实现，如胰岛素溶液中加入表面活性剂等。而且直肠给药的聚乙烯酸水凝胶基质可以改进多肽激素的吸收，比如胰岛素和降血钙素。 有很多方法可以用于提高胰岛素在鼻腔中的驻留时间，很多都是使用thermogelling polymer ethyl(hydroxyethyl)纤维素凝胶，Pluronic F-127，它作为一种溶液形式给药，但是在温度上升时迅速形成半固体的凝胶网络，还有polyacrylic acid水凝胶等。 然而，鼻腔给药多肽和蛋白的生物利用度，包括胰岛素在内，都很低，因为他们的大分子量和亲水性。药物穿过鼻粘膜的弱吸收是因为这些原因如大分子聚合物在鼻粘膜的低渗透性，粘膜纤毛的清除，所以药物很快被清除了，还有酶降解等。这些限制能够通过使用渗透促进剂，生物黏附性高分子增加鼻腔中的驻留时间，酶抑制剂来保护药物不受酶降解。 壳聚糖是β-(1 → 4)-linked 2-acetamido-2-deoxy-D-glucopyranose 和2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose的共聚物。这种聚阳离子生物高聚物一般有甲壳通过碱脱乙酰作用获得。它是甲壳类如虾等外骨骼的主要组成部分。影响壳聚糖性质的主要的参数是他的分子量和脱乙酰度，它表现的是脱乙酰单元所占的比例。这些参数由制备时的条件所决定。而且，他们能通过进一步的修饰，如脱乙酰度可以通过乙酰化来降低，分子量可以通过酸解聚来降低。 这是一个适合的凝胶产品的生物降解基质，归功于它的生物相容性，生物降解能力，生物黏附性质，尤其是它的氨基集团的共价交联的可能性。最后的质量决定了它能够作为一种控释系统基质的稳定性。 鼻腔胰岛素生物利用度可以通过吸收促进剂的共同给药来提高。如表面活性剂，胆酸盐，fusidate衍生物，中链脂肪酸，磷脂，甘油，甘油酸，chilating agents，环糊精等。许多化合物不适于胰岛素通过鼻腔给药的长期治疗，因为他们对鼻上皮粘膜有副作用，而且影响了鼻纤毛的运动。 我们工作的目的就是研究胰岛素以壳聚糖凝胶作为生物黏附性聚合物的鼻腔吸收。它可以增加药物的驻留时间并作为吸收促进剂，除了壳聚糖0.5%的溶液的使用，使得羊的胰岛素AUC提高了七倍以外，据我们所知，还没有其他关于壳聚糖凝胶胰岛素鼻腔给药的其他报道。 材料和方法 壳聚糖(Mw=150000, and 400000, Fluka, Swithzerland)，人的锌胰岛素(26 IU/mg, Li-Lilly, France)，去氧皮质酮纳，卵磷脂，EDTA，皂角甙，氯仿，磷酸二氢钾，氢氧化钠，正己烷，碳酸钠，硫酸铜，酒石酸钠钾，sodium tangstate,，sodium molibdate，磷酸，盐酸，硫酸锂，溴，冰醋酸，Halotane，ketamine，streptozotocin，RIA-based insulin kit，glucose kit 灌注试验 MW大鼠重量250-300g，吸入halotan后腹腔注射可它命50-75mg/kg诱导麻醉，颈部切口暴露气管，通过食道从鼻后腔插入聚乙烯管（直径1-1.5mm），注意不要伤到组织，n