分子生物学技术及其在环境样品微生物分析中的应用.PDF

第 卷第 期 河 海 大 学 学 报 （自然 科 学 版 ） %% % P8F * %% 48 * % 年 月 （ ） !A A M8G;65F 8E /8K5 N6OH;IJL 45JG;5F .H6HI Q5L !A 分子生物学技术及其在环境样品微生物分析中的应用 ， ， ( % ! % 张 瑛 ，阮晓红 （ 河海大学水文水资源与水利工程科学国家重点实验室，江苏 南京 ； (* !($+ ! * 教育部浅水湖泊综合治理与资源开发重点实验室，江苏 南京 !($+； % * 河海大学环境科学与工程学院，江苏 南京 !($+） 摘要：综述了荧光原位杂交（ ）、多聚酶链式反应（ ）、 克隆及 测序等分子生物学技 ,-./ 012 34 34 术，并将这些分子生物学技术应用到淡水水体底泥厌氧氨氧化菌（ 菌）和好氧氨氧化菌的 5657789 原位检测中，从底泥样品中鉴别出这两种细菌，其中好氧氨氧化菌属于亚硝酸单胞菌属，厌氧氨氧 化菌属于5657789 菌的:;85=5 分支，为进一步研究淡水环境中氮的微生物循环过程提供了一定 的依据* 关键词：分子生物学； ； ； 克隆； 测序； 菌 ,-./ 012 34 34 5657789 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） ?$%+ @ ( ( ($+ !A % !#( A ! ! ! 由于微生物过程的重要作用，样品中微生物的检测和鉴定，已成为对自然环境的污染控制和污水处理工 艺优化的重要依据 但是在天然环境中，一般很难形成微生物优势菌种，菌种的多样性给传统的微生物培养 * 技术带来了很大的困难，而且培养过后的微生物往往会与原来样品中的有所偏离，给检测和鉴定带来了偏 差；另外，传统的培养方法耗时耗力，且只对样品中存在的一小部分微生物有效，如对于海水，可以培养的微 ［］ 生物只占总数的 @(B C @ (B ，在淡水水体或底泥中相对较多，但也只占总数的 @!A B ( * 此外，有一些细 菌的世代期很长，而且很难进行分离 因此，传统的微生物培养方法受到了极大的限制 为了解决这一难题，