选修1-生物技术实践简介(深圳2009.10）.pptVIP

2、理解一些基本的名词和概念 3’端和5’端：DNA的羟基的末端称为3’端，磷酸基团的末端称为5’端 3、如条件有限，具体操作可借助于录像完成 ?1.2?培养基的配制与灭菌 ???? 水 琼脂 蔗糖 各种母液 热溶 混调 调pH 分装 灭菌 备用 ??1.3?外植体的选择和预处理 考虑的因素 ???说???明 外植体的年龄 一般情况外植体的年龄越小，分化的程度越小，组培的成功率就越高，因此，尽量选择幼嫩的植物组织或器官作为外植体 外植体的大小 外植体很小和很大都不合适，很小的外植体极容易死亡，很大的外植体不容易消毒，因此，要选择大小适中的外植体。例如，如果用菊花的芽进行组培，选取的芽可为3mm左右 外植体所在的部位 一般选择植物的芽尖、根尖或幼嫩的茎作为外植体，这些部位的组织分裂能力强，容易形成愈伤组织 外植体的外观形态 由于外植体的消毒工作非常重要，因此，要选择哪些表面相对光滑容易消毒的外植体较好 外植体的消毒流程非常关键 ???? 流水冲洗 70～75％的酒精浸泡不超过30s 无菌水震荡冲洗3次 2～10％的次氯酸钠溶液浸泡20min左右 无菌水震荡冲洗5次 教学方案及建议 ??方案1：学生完成外植物体的消毒和接种工作。外植体的消毒工作至关重要，需要那些操作认真、细致的学生才能够很好地完成，因此这种方案要求学生具备一定的操作技能，并且做到耐心、细致。外植体的消毒流程如下。 ?方案2：学生完成愈伤组织的继代培养或分化换瓶。由于减少了外植体消毒这一重要的环节，操作相对简单，成功率很高，学生容易获得成功的满足感。因此，这种方案是针对那些实践操作能力一般的学生而设置的。一方面可以让学生体验组培接种的操作过程，另一方面保证了实验的成功率，节约了实验时间。 方案3：探讨植物生长调节剂的不同浓度对组培的影响。为强凋不同浓度的植物生长调节剂在诱导愈伤组织分化形成丛芽或生根中的作用，可配制植物生长调节剂不同浓度的培养基，然后让学生根据自己的意愿选择这些培养基进行换瓶操作。当学生看到植物生长调节剂的神奇作用时，一定能够深刻地理解激素对植物生长的重要作用，从而激发学生浓厚的探究兴趣。下表为组培中常用的植物生长调节剂的类型及作用。 外植体 脱分化（去分化） 愈伤组织 再分化 形成胚状体或丛芽 生长类激素、细胞分裂类激素 条件 营养条件 激素 温度 无菌 水、无机盐、蔗糖、氨基酸、有机酸等 光 工厂化生产药物 人工种子 微型繁殖 作物脱毒 单倍体育种 突变体的利用 ？ 问题讨论 人工种皮 胚状体 人工种皮:其成份通常为海藻酸钠、明胶、树脂、琼脂糖等大分子有机物，具有细胞膜结构的功能： 能透气，有韧性，耐压，对胚状体无毒害 含有胚状体萌发所需要的营养成分 可添加植物激素 可添加杀菌剂 方法： 花药的离体培养 花药 花粉细胞培养 愈伤组织 分化出小植物 单倍体植株 正常植物 接种离体培养 脱分化 再分化 移栽 染色体加倍 问题 1.花药和花粉培养有何不同？ 2.如何识别单倍体？ 1.植物组织培养的基本原理是什么? 2.激素在脱分化和再分化中的作用有何不同? 3.在实验操作过程中为什么要换瓶操作? 5.组培过程中的每一步都需要光照吗? 4.灭菌和消毒的区别及在组培中的应用? 6.组培中用的蔗糖的作用是什么，用葡萄糖行不行？ 7 .花药离体培养获得的植物幼苗都是单倍体吗？ 培养条件 加蔗糖 不加蔗糖 光 正常生长，分化 不生长，死亡 暗 只生长，不分化 不生长，死亡 （山东09）（8分）人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下： 请回答： （1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行 。 接种前，要对人参根进行 。 （2）用于离体培养的根切块，叫做 。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于 污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于 污染。 （3）用少量 酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。 （4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶剂，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用 方法，操作时应采用 加热。 答案：（1）灭菌 消毒 （2）外植体 真菌（霉菌） 细菌 （3）果胶 （4）萃取（浸取） 水浴 课题1 果胶酶在果汁生产中的作用 课题2 探讨加酶洗衣粉的洗涤效果 课题3 酵母细胞的固定化