第五章.分子生物学的研究方法电泳、杂交.pptVIP

第五章 分子生物学研究的主要方法 序：重组DNA技术回顾 重组DNA技术的定义及步骤 2.克隆（clone): 重组DNA技术的一般步骤 第一节 DNA基本操作技术——一、 DNA提取分离 二、核酸的凝胶电泳 1 原理 2 琼脂糖凝胶电泳 不同浓度琼脂糖凝胶的分辨能力 电泳槽结构 电泳装置 指示剂 溴化乙锭（EB）—DNA：紫外光下 红色荧光 溴化乙锭染色 银染 LMP琼脂糖回收DNA分子 变性胶电泳 3 脉冲电场凝胶电泳 “电泳”思考题 三、 核酸分子杂交 1 Southern blot Southern blot原理模式 Southern blot转移装置图 探针制备及标记 DNA聚合酶法制备探针 随机引物法制备探针 2 Northern blot 3 Western blot 4 原位杂交：菌落杂交和空斑杂交 5 斑点杂交 思考题 1.Southern DNA印迹杂交 2.Northern RNA印迹杂交 3.Western印迹杂交 4.菌落(或噬菌斑)杂交 5.斑点印迹杂交和狭线印迹杂交 返回第二章 根据毛细管作用的原理，使在电泳凝胶中分离的DNA片段转移并结合在适当的滤膜上，然后通过同标记的单链DNA或RNA探针的杂交作用检测这些被转移的DNA片段，这种实验方法叫做DNA印迹杂交技术。由于它是由E．Southern于1