离子交换法纯化重组类人胶原蛋白Ⅱ的的分析研究.pdfVIP

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2017-08-30 发布于安徽
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离子交换法纯化重组类人胶原蛋白Ⅱ的的分析研究.pdf

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摘要 collagenBioproteinII，HcBII)，将菌体经高压匀浆、沉淀、超滤浓缩，得到HcB II的粗品，然后通过离子交换法进一步纯化，获得的HcBII达到电泳纯。其对HcBⅡ的吸附量为54．8mg／g湿树脂，分离因数2．64。 cM52树脂对HcBII的吸附平衡研究表明：HcB II在CM52上的吸附基本符合 II等电点附容量减小，解离系数Kd增大；在3≤pH4范围内，随着pH增大，吸附容量增大，浓度增大，吸附容量减小，解离系数K。增大；温度对Lan鲫uir方程参数的影响较小，温度每升高10℃，吸附容量增加3％左右，解离系数K。的变化不显著。过实验，分别确定了静态吸附和柱层析吸附的操作条件，即静态吸附：在pH4．O、Nacl 在pH4．0、NaCl 上柱，在pH4．O、NaClO．30m01几下进行脱附。实验表明：采用静态吸附的方式吸附作时间短，分辨率高，最终纯化的HcBII达电泳纯，相对分子量为97kD。对cM52吸附HcBII的动力学研究表明：搅拌速度和料液浓度决定了其动力学控制 diffusion 机理。以简单线性推动力模型拟合膜扩散控制(film 的动力学数据，其线性关系良好，模型准确度较高；对于颗粒扩散控制particle diffusion 浓度和温度对FDc模型参数的影响以及溶液浓度和温度对PDC模型参数的影响。关键词：重组类人胶原蛋白II：离子交换；吸附；纯化；动力学 PurificationofRe∞InbinantHuman-like II Collagen BioproteiIl Ion by ExchaIlge Cllromatogr印hy Abstract uscdto I∞exchange血matI)graphy谢tlIlow∞st，、砚s II rec锄出inantEcDff Bioproccina瞰强II)，harves；ted cell w醛lysedbyhigllpres锄re w器collccted hOmOg明izcf，supematallt cnlde bycentriflIging．Af【盯saltprccipiIatiml，the sollnion0f product HCBⅡw船pu衄edwi也ioⅡcxchange of chromato莎Iphy’thepllfity HCBIIcollldreach electropho嘲iSgndepuIity． resinCM52w踮suitablefbrthe of (htion懿ch柚ge HCBⅡtlI锄theotlIcf